诃子(Terminalia chebula)抗系统性念珠菌病的治疗潜力：多维度体外、体内及计算机模拟研究

针对耐药性白色念珠菌(C. albicans)感染的治疗困境，研究人员通过体外抗氧化活性测定(DPPH/ABTS)、体内免疫抑制大鼠模型及计算机分子对接技术，系统评估了诃子(TC)不同制剂(TC-M/6C/30C)的抗真菌机制。结果显示TC能显著提高生存率(62.5-75% vs 12.5%)、降低肾脏真菌负荷，其活性成分(如没食子酸、诃子酸)通过靶向β-微管蛋白、二氢叶酸还原酶(DHFR)和甾醇14α-脱甲基酶发挥协同作用，为天然药物治疗系统性念珠菌病提供了新策略。

　　

论文解读

念珠菌病正成为全球健康威胁，尤其是免疫抑制患者面临的系统性感染。白色念珠菌(C. albicans)作为主要病原体，其耐药性问题日益严峻，现有抗真菌药物如氟康唑因靶点单一易引发耐药。天然药物因其多靶点作用备受关注，但诃子(Terminalia chebula, TC)这类传统药材的科学验证仍存在空白——其体内疗效、活性成分及分子机制亟待系统研究。

为破解这一难题，国内研究人员在《Fitoterapia》发表的研究中，创新性采用"体外-体内-计算机"三位一体策略。通过体外测定总酚含量(56.5 mg GAE/mL)和抗氧化活性(DPPH 32.5 mg GAE/mL)，结合LC-MS/MS鉴定33种活性成分；建立环磷酰胺免疫抑制大鼠模型，评估TC-M/6C/30C三种制剂对生存率、器官保护及氧化应激指标(SOD/GSH)的影响；最后通过分子对接模拟关键成分与真菌靶点(β-tubulin/DHFR/sterol 14α-demethylase)的相互作用。

主要技术方法
研究采用分光光度法测定酚类含量(GAE为标准)和DPPH/ABTS自由基清除能力；通过CLSI标准微量稀释法确定最小抑制体积(20 μL≈0.55 mg/mL)；建立环磷酰胺(150 mg/kg)诱导的免疫抑制大鼠模型，腹腔注射C. albicans(1×10⁷ CFU)诱发系统性感染；使用LC-MS/MS(液相色谱-串联质谱)进行植物化学分析；采用AutoDock Vina软件对活性成分与真菌靶蛋白进行分子对接。

研究结果

体外抗真菌与抗氧化活性
TC-M展现出显著抗氧化能力(DPPH IC₅₀ 32.5 mg/mL)，其酚类物质含量与抗C. albicans活性呈正相关。微量稀释实验证实TC-M能破坏真菌细胞膜完整性，抑制浓度低于常规抗真菌剂。

体内治疗效果评估
在免疫抑制大鼠模型中，TC制剂组8天生存率提升5-6倍(75% vs 12.5%)。治疗组肾脏真菌负荷降低2个数量级，病理切片显示肾小管坏死显著减轻。同时，TC-M能逆转免疫抑制导致的白细胞减少，恢复超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)至正常水平。

活性成分与作用机制
LC-MS/MS鉴定出诃子酸、没食子酸等核心成分。计算机模拟显示：诃子酸与β-tubulin的Gln134形成氢键(类似灰黄霉素作用)；没食子酸通过π-π堆积作用于DHFR的Phe36；而诃子酸与甾醇14α-脱甲基酶血红素铁配位，阻断麦角甾醇合成通路。

结论与意义
该研究首次证实TC通过多靶点协同发挥抗真菌作用：既直接抑制真菌关键酶(β-tubulin/DHFR/CYP51)，又通过抗氧化(SOD/GSH)和免疫调节(白细胞计数恢复)改善宿主微环境。特别值得注意的是，低剂量TC(6C/30C)仍保持显著疗效，这为开发低毒高效的植物源抗真菌制剂提供了理论依据。研究建立的"化学成分-体内药效-计算模拟"整合研究范式，也为其他传统药物的现代化研究提供了方法论参考。