Hinokitiol通过抗氧化及调控自噬功能保护视网膜色素上皮细胞对抗氧化应激损伤：对年龄相关性黄斑变性治疗的启示

推荐 为解决氧化应激诱导的活性氧（ROS）导致视网膜色素上皮（RPE）细胞功能障碍，进而引发年龄相关性黄斑变性（AMD）的问题，研究人员探究了天然化合物Hinokitiol的作用。结果显示其可增强细胞活力、减少ROS、维持线粒体功能等，有望成为AMD治疗的新候选药物。

　　

论文解读
在当今社会，眼部健康问题日益受到关注，其中年龄相关性黄斑变性（AMD）作为一种在老年人中高发的致盲性眼病，严重影响了患者的生活质量。AMD的发病机制较为复杂，其中视网膜色素上皮（RPE）细胞的退化是关键因素之一。而氧化应激所诱导产生的活性氧（ROS）在AMD的进展中扮演着重要角色。正常情况下，细胞内的抗氧化系统可以维持ROS的平衡，但当ROS水平过高时，就会对细胞造成损伤。同时，自噬作为细胞内清除受损细胞器和错误折叠蛋白的重要机制，对于维持视网膜内环境稳定至关重要。然而，过多的ROS会破坏自噬平衡，导致细胞成分过度降解，最终引发细胞死亡。

为了深入研究如何应对氧化应激对RPE细胞的损伤，来自中国台湾的研究人员开展了此项研究。他们聚焦于一种天然化合物——Hinokitiol，该化合物具有强大的抗氧化特性。研究人员通过一系列实验，旨在探究Hinokitiol对H₂O₂诱导的RPE细胞氧化损伤的作用及其潜在机制。

作者为开展研究用到以下主要关键技术方法：采用MTT和结晶紫染色评估细胞活力；使用H₂DCFDA和MitoSOX探针测量ROS；以催化酶活性评估抗氧化能力；通过γ - H2AX免疫细胞化学和彗星实验评估DNA损伤；运用JC - 1分析线粒体膜电位（MMP）；通过蛋白质印迹法（Western blotting）检测自噬标志物。

研究结果如下：

• Hinokitiol对H₂O₂诱导的ARPE - 19细胞活力抑制的保护作用：不同剂量的Hinokitiol（1, 10, 50, 75, 100 μM）处理24、48小时，对RPE细胞活力无影响；而H₂O₂单独处理时，在200 - 500 μM浓度范围内，细胞活力呈剂量依赖性显著下降。
• Hinokitiol对氧化应激相关指标的影响：Hinokitiol显著增强了RPE细胞活力，降低了ROS水平，通过增加催化酶活性来实现。同时，它还保留了线粒体功能，减轻了DNA损伤。
• Hinokitiol对自噬的影响：Hinokitiol恢复了被H₂O₂破坏的自噬溶酶体融合，维持了细胞内稳态。

讨论部分强调了研究的重要意义。AMD分为干性和湿性两种主要类型，干性AMD主要由RPE下方的玻璃膜疣沉积、氧化应激反应失调、蛋白质稳态受损以及线粒体功能障碍等因素驱动，最终导致RPE退化。在治疗方面，抗血管内皮生长因子（VEGF）疗法是湿性AMD的标准治疗方法。而本研究发现的Hinokitiol，它不仅能够有效减轻ROS诱导的氧化损伤，通过增强抗氧化酶活性和下调Nrf - 2/HO - 1蛋白表达发挥作用，还能抑制DNA片段化并缓解自噬功能障碍，对维持细胞内稳态有着积极贡献。这些令人鼓舞的研究结果为Hinokitiol作为潜在的天然化合物用于体内应用提供了有力支持，未来有望进一步开展相关研究，推动其在AMD治疗领域的应用，为AMD患者带来新的治疗希望。本研究发表在《Free Radical Biology and Medicine》上，具有一定的学术价值和应用前景。