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为解决阿尔茨海默病（AD）有效疾病修饰疗法匮乏的问题，研究人员开展 12A12 单克隆抗体（mAb）靶向 N 端 tau 片段（NH?htau）的研究，发现其可改善 Tg2576 小鼠认知、减少 Aβ 病理等，为 AD 免疫治疗提供依据。
阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease, AD）如同隐匿的认知杀手，正以惊人的速度在全球范围内蔓延。据统计，全球 AD 患者数量持续攀升，然而临床获批的对症治疗药物寥寥无几，开发能真正改变疾病进程的疗法迫在眉睫。AD 的核心病理特征是 β- 淀粉样蛋白（Aβ）沉积和 tau 蛋白病理，二者相互作用驱动着疾病的发展。尽管已有研究提示 Aβ 与 tau 之间存在关联，但如何有效干预这一相互作用以阻断疾病进展仍是未解之谜。在此背景下，探寻针对 tau 和 Aβ 的新型治疗策略成为科学界的焦点。
来自意大利国家研究委员会转化药理学研究所（IFT-CNR）、欧洲脑研究所以及圣卢西亚基金会等机构的研究人员，聚焦于 N 端 tau 蛋白片段（NH?htau）这一关键靶点，开展了一系列富有创新性的研究。他们以 Tg2576 APP/Aβ 小鼠模型为研究对象，该模型能模拟人类 Aβ 淀粉样变性，随着年龄增长出现 Aβ 积累、聚集及斑块沉积。研究团队旨在探究靶向 NH?htau 的 12A12 单克隆抗体（mAb）能否在短期内干预后产生长期神经保护效应，为 AD 治疗开辟新路径。这项研究成果发表在《Acta Neuropathologica Communications》上，为 AD 的治疗带来了新的希望。
研究人员采用了多种关键技术方法来揭示 12A12 mAb 的作用机制。首先是行为学测试，通过新物体识别任务（NOR task）评估小鼠的认知功能，该任务基于啮齿类动物对新异刺激的自发探索行为，是衡量海马依赖性长期情景记忆的重要手段。其次运用免疫印迹（Western Blot）技术，检测海马组织中 tau 蛋白、Aβ 蛋白及其相关修饰形式的表达水平，以分析蛋白层面的变化。免疫荧光（Immunofluorescence）则用于观察蛋白在脑组织中的定位和分布，直观呈现病理变化。此外，还通过酶联免疫吸附试验（ELISA）测定抗体在海马中的浓度，以及利用蛋白质分级分离技术分析不同溶解性的 Aβ 组分，全面揭示药物的作用靶点和机制。实验所用的 Tg2576 小鼠为杂合子，雌雄均有，6 月龄时随机分组，包括野生型对照组、Tg2576 生理盐水对照组和 Tg2576+12A12 mAb 治疗组，确保了实验设计的科学性和可靠性。
急性治疗对认知功能的长期改善
研究发现，对 6 月龄有症状的 Tg2576 小鼠进行 14 天的 12A12 mAb 急性治疗（4 剂），即使在停药 3 个月后（小鼠达 9 月龄），其认知功能仍得到显著改善。在 NOR 测试中，与未治疗的 Tg2576 小鼠相比，治疗组小鼠对新物体的探索时间和次数明显增加，表明其识别记忆能力显著恢复。组织学分析显示，野生型小鼠海马 CA3 区锥体细胞形态正常，而未治疗的 Tg2576 小鼠锥体细胞出现退化、形状不规则、胞质嗜酸性深染及核固缩等病理变化，脑膜和皮质下血管也存在扩张充血现象。然而，接受 12A12 mAb 治疗的 Tg2576 小鼠锥体细胞形态接近野生型，血管未见异常，说明该治疗对海马细胞结构具有保护作用，证实了短期治疗的长期认知改善效应并非偶然，而是与神经结构的保护密切相关。
NH?htau 水平的持续降低
进一步研究发现，9 月龄 Tg2576 小鼠海马中的 NH?htau 水平在停药后未重新升高。免疫印迹和免疫荧光结果均显示，未治疗的 Tg2576 小鼠 NH?htau 表达显著高于野生型，而治疗组 NH?htau 水平明显低于未治疗组。这表明 12A12 mAb 的短暂作用能够持久抑制 NH?htau 的产生，提示 tau 蛋白的 N 端截短这一病理修饰一旦被干预，其进展可能依赖于 Aβ 的成熟，而非独立持续发展。这种对 tau 病理的持久抑制，为阻断 AD 病理进程提供了关键依据。
对 Aβ 聚集的抑制作用
在 Aβ 病理方面，12A12 mAb 治疗显著影响了 Aβ 的聚集模式。Western Blot 结果显示，治疗组小鼠海马中 4kDa 的 Aβ 单体水平升高，而 A11 阳性的毒性 prefibrillar 寡聚体减少，OC 阳性的纤维状寡聚体无明显变化。 native dot-blot 和免疫荧光分析进一步证实，治疗组小鼠脑内 A11 阳性的细胞内 Aβ 寡聚体沉积减少，且 Aβ 的聚集途径从毒性更强的 prefibrillar 形式转向毒性较低的单体形式。值得注意的是，APP 的表达水平及其淀粉样蛋白生成途径（如 BACE1 和 C99 片段）未受治疗影响，说明 12A12 mAb 并非通过减少 Aβ 生成，而是通过抑制其聚集发挥作用，这为理解 Aβ 在 AD 中的作用机制提供了新视角。
对神经炎症和突触功能的调节
神经炎症和突触损伤是 AD 的重要特征。研究表明，未治疗的 Tg2576 小鼠海马中小胶质细胞活化标志物 Iba1 表达升高，而 12A12 mAb 治疗显著下调了 Iba1 的表达，减轻了小胶质细胞增生，却未影响星形胶质细胞标志物 GFAP 的表达，提示其抗炎作用具有特异性。在突触功能方面，治疗组小鼠海马中突触相关蛋白 PSD95、α- 突触核蛋白和 SNAP25 的表达恢复至野生型水平，表明突触失衡得到纠正，突触稳定性增强。这些结果表明，12A12 mAb 通过调节神经炎症和突触功能，多维度地改善了 AD 病理环境。
综上所述，这项研究揭示了 N 端 tau 蛋白片段在 AD 病理进程中与 Aβ 的早期协同作用，证实了 12A12 mAb 通过短暂中和 NH?htau，能够产生持久的神经保护效应，其机制包括抑制 Aβ prefibrillar 寡聚体形成、促进单体转化、减轻神经炎症和恢复突触功能等。这些发现为 AD 的治疗提供了双重意义：一方面，明确了 NH?htau 作为治疗靶点的潜力，拓展了 AD 治疗的靶点选择；另一方面，展示了短期免疫治疗可能实现长期疗效，为优化 AD 治疗方案提供了新方向，有望减少长期连续治疗带来的副作用和患者负担。尽管研究仍存在物种差异等局限性，但无疑为 AD 的临床转化研究注入了强大动力，推动着 AD 治疗向更有效、更安全的方向迈进。
