Germacrone通过抑制Nrf2/Rbp4通路改善酒精性脂肪肝的效应与机制研究

为解决酒精性肝病（ALD）中氧化应激失衡与脂代谢紊乱的核心病理问题，广州中医药大学与西藏藏医药大学联合团队开展Germacrone调控Nrf2/Rbp4通路的研究。研究发现Germacrone通过抑制Nrf2核转位及下游靶基因Rbp4的表达，显著改善肝脂沉积与氧化损伤，首次揭示Rbp4是Nrf2的新型下游靶点，为ALD治疗提供新策略。

　　

酒精性肝病（ALD）是全球肝病相关死亡的重要诱因，其核心病理特征——氧化应激与脂代谢紊乱，至今缺乏特异性治疗药物。传统藏药"甲嘎松汤"（JGST）虽在临床显示疗效，但分子机制尚未阐明。更关键的是，核转录因子Nrf2作为抗氧化关键调节因子，其过度激活竟会加剧脂质沉积；而脂代谢调控蛋白Rbp4的异常表达又与肝脂肪变性密切相关。这种矛盾现象背后，是否存在Nrf2直接调控Rbp4的分子通路？广州中医药大学与西藏藏医药大学的研究团队在《Chinese Medicine》发表的研究，揭开了这一谜题。

研究采用多组学联用策略：通过蛋白质组学筛选JGST改善ALD的潜在靶点；结合网络药理学锁定核心成分Germacrone；建立C57BL/6小鼠ALD模型及乙醇刺激的HepG2细胞模型，采用H&E染色、油红O染色评估病理改善；通过Western blot、RT-qPCR检测Nrf2/Rbp4通路变化；创新性运用ChIP-qPCR验证Nrf2与Rbp4启动子的直接结合；最后通过Nrf2基因敲除/过表达实验完成机制验证。

蛋白质组学揭示JGST改善ALD的潜在靶点
质谱鉴定出6177个蛋白质，发现ALD模型组HO-1、Gsta1和Rbp4表达显著升高，且Rbp4与肝脏甘油三酯（TG）水平呈正相关。JGST干预后，这些异常表达被显著抑制。

网络药理学锁定Germacrone为核心成分
分析1191个JGST相关靶点与1306个ALD相关基因，发现Germacrone对应15个核心靶点，覆盖数量最多。KEGG富集显示靶点显著集中于"脂肪细胞脂解调节"等脂代谢通路。

Germacrone改善ALD模型的脂质积累与氧化应激
动物实验显示，Germacrone（10 mg/kg）使肝脂肪空泡减少50%以上，ALT、AST水平降低40%，同时逆转模型组MDA升高和GSH、SOD下降。细胞实验证实2μM Germacrone即可降低乙醇诱导的TG异常积累。

Nrf2/Rbp4通路的调控机制
关键发现有三：1）ChIP-seq证实Nrf2特异性结合Rbp4启动子区（-1534~-1473 bp），TBHQ激活Nrf2时结合强度增加3倍；2）Nrf2基因敲除小鼠肝脏Rbp4蛋白降低60%，而过表达使Rbp4 mRNA升高2.1倍；3）ALD模型组Nrf2与Rbp4启动子结合强度较对照组增加2.5倍。

讨论与意义
该研究首次阐明：1）Rbp4是Nrf2转录调控的下游靶基因，构成"Nrf2-Rbp4-脂质沉积"的正反馈环路；2）Germacrone作为JGST的核心活性成分，通过阻断该通路发挥"抗氧化-调脂"双重作用，与传统藏医"温药祛寒"理论高度契合；3）为开发靶向Nrf2/Rbp4的ALD治疗策略提供直接依据。局限性在于未采用高脂饮食复合模型，且缺乏肝脏条件性敲除验证。未来研究可探索Germacrone是否通过外泌体Rbp4调控库普弗细胞极化，这将为ALD免疫代谢调控开辟新视角。