综述：探索中性粒细胞胞外诱捕网：免疫调节机制与未来治疗潜力

这篇综述系统阐述了中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的双重作用：既通过DNA-抗菌蛋白复合体清除病原体（如COVID-19中的SARS-CoV-2），又在自身免疫疾病（如SLE）和肿瘤转移中加剧病理损伤。重点解析了NOX依赖/非依赖的NETosis形成机制（涉及PAD4、MPO、ROS）、与免疫细胞（CD8+ T细胞、NK细胞、巨噬细胞）的互作，并探讨了靶向NET的临床策略（如DNase I、PAD4抑制剂Cl-amidine）。

　　

引言

中性粒细胞作为循环白细胞的主要组分（50%-79%），是抵御病原体的第一道防线。近年研究发现其高度异质性，尤其在肿瘤微环境（TME）中分化为促瘤（N2）或抑瘤（N1）表型。2004年，Brinkmann等首次描述NETs——由DNA骨架嵌入组蛋白（如citH3）、抗菌蛋白（NE、MPO）构成的网状结构，既能捕获微生物，又在非感染性疾病中呈现"双刃剑"效应。

NET形成机制与调控

病原体与其他诱导因素
细菌（如大肠杆菌E. coli）、病毒（HBV、SARS-CoV-2）、真菌（白色念珠菌C. albicans）及内源性因子（IL-8、TNF-α）均可触发NETs。表1汇总了不同刺激物的致病/保护作用，例如COVID-19重症患者中NETs通过IL-1β加剧肺损伤。

经典调控通路

1. NOX依赖性NETosis（自杀性）：PMA或微生物激活PKC-Raf-MEK-ERK通路，升高ROS促使NE核转位，水解组蛋白并协同MPO引发染色质解凝。关键分子包括：

   • PAD4介导的组蛋白瓜氨酸化
   • CDK4/6磷酸化核纤层蛋白B破坏核膜
   • GSDMD增强膜通透性促NET释放

2. NOX非依赖性途径（存活性）：GM-CSF或血小板通过PAD4直接解凝染色质，形成囊泡化NETs而不导致细胞死亡。

3. 线粒体DNA驱动NETosis：LPS/C5a刺激下，线粒体ROS通过糖酵解ATP重构细胞骨架，释放mtDNA激活cGAS/STING通路，与SLE发病相关。

自噬的协同作用
mTOR-PI3K轴调控自噬与NETs形成：

• 雷帕霉素激活自噬促进NETs，而3-MA抑制PI3K III类可减轻ANCA相关性血管炎中的NETosis
• 溃疡性结肠炎中REDD1通过自噬-NET-IL-1β轴放大炎症

NET与适应性免疫的互作

CD8⁺ T细胞耗竭
NETs通过PD-L1/Arg1抑制T细胞功能，并借TMCO6结合DNA触发TGF-β1自分泌循环。DNase降解可逆转此效应，增强PD-1抑制剂疗效。

CD4⁺ T细胞极化

• NASH中NETs通过TLR4驱动Treg分化
• 类风湿关节炎（RA）中NETs激活DC促进Th1/Th17偏移
• 乳腺癌肺转移时STAT6-C3正反馈环招募NETs

B细胞自身免疫应答
SLE患者NETs的LL37-DNA复合物通过TLR9激活B细胞，产生抗瓜氨酸化蛋白抗体（ACPA），而BAFF进一步维持B细胞存活。

NET与天然免疫的互作

NK细胞双向调控

• HBV感染中NK通过GSDMD/caspase-8诱发肝细胞焦亡，释放HMGB1激活NETs
• 结肠癌NETs通过SKAP1-NFATc1/CXCL8抑制NK杀伤

树突状细胞（DC）抗原提呈
NETs的突变核磷蛋白（NPMc⁺）可被DC摄取，用于白血病疫苗开发；但COPD中NETs通过NF-κB非依赖IFN-α加重炎症。

巨噬细胞动态平衡

• M1巨噬细胞通过MMP12降解NETs并清除补体C3
• 脓毒症中NETs诱导巨噬细胞焦亡，形成线粒体转移的恶性循环
• 糖尿病动脉粥样硬化中NETs促进M1极化，而PAD2抑制转向M2修复表型

靶向NET的治疗策略

抑制形成

• PAD4抑制剂Cl-amidine（关节炎）和GSK484（卵巢癌）
• NE抑制剂Sivelestat（ARDS）
• MPO抑制剂PF-1355（肾小球肾炎）
• CXCR1/2拮抗剂Reparixin（联合免疫治疗）

促进降解

• 外源DNase I降低结肠癌肝转移
• 运动增强内源性DNase活性

调控释放

• 抗氧化剂NAC（胆汁闭锁）
• CTSC抑制剂AZD7986（乳腺癌）

结论与展望

NET研究尚存空白：PAD4精确激活机制、时空特异性调控策略等。未来需开发阶段化干预手段——感染早期增强NETs抗菌功能，而自身免疫/肿瘤中抑制其病理效应。靶向NET-免疫微环境互作（如TLR9、AMPK）可能开辟精准治疗新途径。