肿瘤相关巨噬细胞通过调控Pol η介导的跨损伤DNA合成促进卵巢癌顺铂耐药机制研究

为解决卵巢癌顺铂耐药难题，印度化学生物学研究所团队揭示了肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）通过激活p65/RelA依赖的跨损伤DNA合成（TLS）通路（上调Pol η/RAD18/REV1）并抑制高保真核苷酸切除修复（NER）机制，促进癌症干细胞特性及化疗抵抗的创新机制，为靶向TAMs的联合治疗策略提供理论依据。

　　

卵巢癌是女性生殖系统最致命的恶性肿瘤之一，顺铂化疗耐药是临床治疗失败的主要原因。尽管肿瘤微环境（TME）中免疫细胞的作用日益受到关注，但肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）如何直接调控癌细胞DNA损伤应答的机制仍不明确。印度化学生物学研究所的Bilash Chatterjee团队在《Cellular and Molecular Life Sciences》发表的研究，首次揭示了TAMs通过表观遗传重编程重塑癌细胞DNA修复通路的全新机制。

研究团队整合了单细胞转录组分析（10X Genomics）、蛋白质互作网络（GeneMANIA/Metascape）、体外共培养模型（THP1-卵巢癌细胞系/原代BMDMs）、基因敲降（shPOLH稳定株）和小鼠异种移植实验等多维度技术。临床样本分析（来自Chittaranjan国家癌症研究所）和TCGA数据挖掘进一步验证了关键发现。

TAMs通过TLS通路激活促进DNA损伤旁路
共培养实验显示TAMs显著上调癌细胞中Pol η、RAD18和REV1的表达（mRNA和蛋白水平），同时降低NER通路关键因子XPC/XPA/XPD的表达。DNA修复动力学实验证实，共培养组癌细胞在顺铂处理后能更快清除γH₂AX焦点（彗星实验验证），且干细胞标志物CD44⁺CD117⁺群体扩增（流式细胞术）。Pol η敲除后，TAMs诱导的干细胞富集效应消失，证实TLS通路的核心作用。

p65/RelA介导的转录调控机制
染色质免疫沉淀（ChIP-qPCR）发现共培养条件下p65核转位增强，直接结合POLH启动子区域（设计两对引物验证）。NF-κB抑制剂pristimerin处理可阻断Pol η上调，表明TAMs通过分泌IL-6等细胞因子（膜芯片检测）激活p65依赖性转录。

M2型巨噬细胞表型转化与临床关联
单细胞测序（GSE184880数据集）显示化疗耐药患者肿瘤中M2标志物（CD206⁺CD163⁺）巨噬细胞富集。小鼠模型证实THP1共注射组肿瘤体积更大（p<0.001），且淋巴结转移灶中存在Arg1⁺巨噬细胞浸润。临床样本免疫荧光显示Pol η表达与M2密度呈正相关（p<0.0001）。

该研究阐明了TAMs通过"p65-Pol η-TLS"轴诱导基因组不稳定性与化疗抵抗的级联反应，提出靶向TAMs与TLS通路（如联合pristimerin）的精准治疗策略。研究首次将免疫微环境与DNA修复表观调控关联，为克服卵巢癌耐药提供了突破性视角。