Claudin-6介导胚胎干细胞驱动的抗乳腺癌免疫应答机制研究

本研究针对乳腺癌免疫治疗抗原来源受限的难题，创新性地利用小鼠胚胎干细胞（ESCs）诱导抗肿瘤免疫反应。团队发现2i抑制剂撤除可促使TNG-A细胞获得肿瘤样特征，并通过Claudin-6依赖机制显著抑制E0771乳腺癌模型生长，为开发新型异体干细胞疫苗提供理论依据。

　　

在癌症治疗领域，寻找高效且通用的肿瘤抗原来源一直是免疫治疗的核心挑战。传统自体免疫疗法存在制备周期长、成本高等局限，而诱导多能干细胞（iPSCs）虽展现出潜力，但其临床应用仍面临重编程效率和安全性的双重考验。与此同时，胚胎干细胞（ESCs）作为天然多能性细胞，其与肿瘤细胞的分子相似性长期被忽视。来自阿威罗大学医学科学系的研究团队在《iScience》发表的研究，首次揭示了ESCs通过Claudin-6介导的独特机制激活抗肿瘤免疫应答，为癌症疫苗开发开辟了新路径。

研究采用RNA测序、质谱蛋白质组学和免疫荧光等关键技术，通过C57BL/6J小鼠模型评估了TNG-A细胞（携带Nanog-GFP报告基因的小鼠ESC系）对E0771乳腺癌细胞的抑制作用。实验设计包含2i抑制剂（CHIR99021和PD0325901）撤除的时间梯度比较，并利用siRNA和LNA gapmer进行基因敲降验证。

主要研究发现
TNG-A细胞在2i撤除后快速获得肿瘤样特征
转录组分析显示，撤除MEK1/2和GSK3-β抑制剂24-48小时内，TNG-A细胞出现上皮-间质转化（EMT）特征：间质标志物Zeb2和Dnmt3a上调，而多能性因子Nanog和Pou5f1下调。蛋白质组学证实，48小时后其蛋白表达谱与E0771癌细胞相似度显著提高（287个差异蛋白减少至35个）。

时序性免疫暴露决定抗肿瘤效果
预防性接种实验显示，热灭活TNG-A细胞（无论是否含2i）可使肿瘤体积缩小80%以上，而治疗性接种无效。血清细胞因子检测发现，免疫组小鼠早期即产生高水平的IL-2（154±21 pg/mL）和IL-10（89±15 pg/mL），提示Th1型免疫激活。

Claudin-6是抗肿瘤效应的关键介质
通过免疫荧光证实，2i撤除使Claudin-6表达量提升3.2倍（p<0.001）。当使用25 nM Cldn6 siRNA敲降后，TNG-A细胞的肿瘤抑制能力完全丧失（肿瘤体积从0.12±0.03 cm³增至1.15±0.21 cm³），而c-Myc敲降组仍保持疗效。

这项研究不仅阐明了ESCs作为异体肿瘤抗原库的可行性，更发现Claudin-6是连接干细胞生物学与肿瘤免疫的重要桥梁。其创新性体现在：首次证明短期培养条件改变即可诱导ESC获得免疫原性；揭示了Claudin-6在肿瘤免疫监视中的新功能；为开发"现货型"干细胞疫苗提供了理论支持。未来研究需进一步解析ESC抗原呈递的具体免疫机制，并探索该策略在更多癌种中的适用性。