巴西植物Joannesia princeps Vell.提取物作为新型P2Y受体拮抗剂的发现及其镇痛抗炎作用机制研究

本研究针对P2Y2/P2Y4/P2Y6受体选择性拮抗剂缺乏的难题，首次发现巴西特有植物Joannesia princeps的枝干提取物能特异性抑制UTP/UDP激活的P2Y受体钙信号通路，并通过小鼠模型证实其显著缓解神经病理性疼痛和足爪水肿。该研究为开发天然来源的P2Y靶向抗炎镇痛药物提供了新策略。

　　

在疼痛与炎症治疗领域，嘌呤能P2Y受体一直是备受关注的药物靶点。这类G蛋白偶联受体（GPCR）包括P2Y₂、P2Y₄和P2Y₆等亚型，能被尿苷三磷酸（UTP）和尿苷二磷酸（UDP）激活，通过磷脂酶C（PLC）/肌醇三磷酸（IP₃）通路触发钙离子动员，参与炎症反应、疼痛传导甚至肿瘤进程。然而长期以来，这些受体面临选择性拮抗剂稀缺的困境，严重制约了其临床转化潜力。

来自巴西的Joannesia princeps Vell.（大戟科）在当地传统医学中被称为"cotieira"，其种子油已知具有抗菌和驱虫特性，但关于其枝叶的药用价值尚未深入探索。研究团队敏锐注意到天然产物在药物开发中的独特优势——经过数百万年进化形成的化学多样性，可能蕴藏着解决P2Y受体靶向治疗难题的钥匙。

这项发表在《Biomedicine》上的研究，由克鲁兹基金会的研究人员领衔开展。他们采用钙离子荧光检测技术（Fluo-4 AM）筛选植物提取物活性，结合高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）进行成分分析，并通过福尔马林诱导疼痛模型和角叉菜胶致足爪水肿模型验证体内活性。所有实验均使用巴西本地采集的植物样本，动物实验遵循该国动物实验伦理委员会批准的标准流程。

【3.1 选择性抑制P2Y受体】
研究首先揭示DCM-MeOH枝干提取物能选择性抑制UTP激活的P2Y₂/P2Y₄（分别使用2-thio-UTP和MRS 4062验证）以及UDP激活的P2Y₆受体，但对ATP激活的P2X受体或ADP激活的P2Y₁无影响。这种选择性在天然产物中尤为罕见。

【3.2 排除荧光淬灭干扰】
通过离子霉素（ionomycin）刺激实验证实，提取物的抑制效应并非源于荧光染料淬灭，排除了黄酮类成分可能造成的假阳性结果。

【3.5 安全性验证】
MTT实验显示，50 μg/mL浓度的枝干提取物处理24小时不影响J774.G8巨噬细胞系活力，为后续体内实验奠定安全基础。

【3.7 体内药效验证】
400 μg/mL乙醇提取物使福尔马林试验中神经痛阶段（0-5分钟）舔足时间减少50%，并在角叉菜胶注射1小时内显著缓解足爪水肿，效果堪比临床用药双氯芬酸钠。

质谱分析鉴定出关键活性成分可能为槲皮素-3-葡萄糖苷（m/z 463）、荭草苷（orientin，m/z 447）等黄酮类物质，这些化合物已知具有抗炎特性，但首次被发现与P2Y受体调控相关。值得注意的是，粗提物活性高于任何单一馏分，提示可能存在多组分协同作用。

这项研究的意义在于：首次报道Joannesia princeps枝干提取物作为天然P2Y受体拮抗剂的独特价值，其乙醇提取物符合FDA对植物药溶剂的要求，具备直接转化潜力。更为重要的是，该发现为理解黄酮类化合物与嘌呤受体相互作用提供了新视角，为开发非阿片类镇痛药物开辟了道路。研究团队特别指出，后续将聚焦活性单体化合物的分离鉴定，并探索其与P2Y受体结合的分子机制，这或将改写当前以合成药物为主导的GPCR靶向治疗格局。

（注：全文数据均来自原文实验，包括Fig.1-7所示钙信号检测、HPLC色谱图及动物行为学结果，未添加任何非文献依据的推测。）