布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂依鲁替尼通过调控免疫抑制性T细胞抑制头颈鳞状细胞癌的机制研究

为解决头颈鳞状细胞癌(HNSCC)治疗手段有限且预后差的问题，研究人员探索了布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂依鲁替尼(Ibrutinib)的抗肿瘤机制。研究发现，依鲁替尼通过直接抑制BTK活性，减少表达PD-1/LAG-3/IL-10的免疫抑制性T细胞浸润，同时增强细胞毒性T细胞功能，显著降低肿瘤负荷和转移，并提高生存率。该研究为HNSCC的免疫治疗提供了新靶点，发表于《Cancer Immunology, Immunotherapy》。

　　

头颈鳞状细胞癌(HNSCC)是全球第六大高发恶性肿瘤，五年生存率仅40-50%，尤其人乳头瘤病毒(HPV)阴性患者对放化疗易产生耐药性。目前治疗手段以破坏性手术和联合放化疗为主，严重影响患者生活质量。近年来，布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)在实体瘤中的作用备受关注，但其在HNSCC中的免疫调控机制尚不明确。美国俄亥俄州立大学的研究团队通过免疫活性小鼠模型和分子实验，揭示了BTK抑制剂依鲁替尼通过双重机制——直接抑制肿瘤细胞转移和重塑免疫微环境——对抗HNSCC的突破性发现，相关成果发表于《Cancer Immunology, Immunotherapy》。

研究采用正交移植MOC2细胞的小鼠模型，结合流式细胞术、免疫荧光、Western blot等技术，系统评估了依鲁替尼对肿瘤生长、转移及免疫细胞亚群的影响。关键实验包括：体外细胞增殖/迁移实验、体内肿瘤体积监测、免疫细胞表型分析（UMAP降维和FlowSOM聚类）以及T细胞功能验证实验。

Ibrutinib抑制HNSCC增殖并提高生存率
研究发现人源(CAL27/SCC83)和小鼠(MOC2)HNSCC细胞均表达BTK蛋白，依鲁替尼对三者的IC₅₀值为5.21-26.16μM。在MOC2原位移植模型中，5mg/kg剂量使肿瘤体积缩小60%，生存率从33%提升至100%（图1D-F）。

依鲁替尼抑制淋巴和肺转移
组织病理学显示，治疗组淋巴结转移率降低50%，肺转移灶减少（图2B,D）。划痕实验证实依鲁替尼剂量依赖性抑制细胞迁移（图2E,F），提示其通过阻断上皮-间质转化(EMT)抑制转移。

调控T细胞表型与抑制耗竭标记物
流式分析发现，肿瘤微环境中CD8⁺T细胞浸润增加2倍，而PD-1⁺CD8⁺T细胞减少40%（图3D）。OMIQ软件分析揭示TIM3⁺PD-1⁺和LAG-3⁺PD-1⁺耗竭性T细胞亚群显著下降（图3I）。

直接抑制T细胞免疫抑制功能
体外实验证实，依鲁替尼直接降低活化T细胞的PD-1/LAG-3表达（图4C-E），而非通过肿瘤细胞旁分泌作用。ELISA检测显示IL-10分泌减少70%（图5G），与体内结果一致。

增强T细胞毒性功能
免疫荧光显示肿瘤内颗粒酶B⁺CD8⁺T细胞增加3倍（图6A），淋巴结中颗粒酶B⁺CD4⁺/CD8⁺T细胞分别升高45%和60%（图6B）。

调控髓系细胞PD-L1表达
虽然M2型巨噬细胞在肿瘤中增加，但G-MDSC和M1型巨噬细胞的PD-L1表达显著降低（图7F），提示其可能增强PD-1抑制剂疗效。

该研究首次阐明依鲁替尼通过双重机制对抗HNSCC：既直接抑制肿瘤转移，又重塑免疫微环境——减少耗竭性T细胞（PD-1⁺/LAG-3⁺/IL-10⁺）并增强细胞毒性T细胞功能。值得注意的是，依鲁替尼对T细胞的调控独立于BTK，可能通过抑制ITK（白细胞介素-2诱导性T细胞激酶）等靶点实现。研究为HNSCC的联合免疫治疗提供了理论依据，尤其针对PD-1抑制剂疗效有限的患者群体。未来需进一步探索依鲁替尼与其他免疫检查点抑制剂的协同作用及临床转化潜力。