基于蛋白质组学的人肋骨骨髓分析：探索创伤后生命反应现象及其法医学应用

本研究针对法医病理学中骨骼创伤生命反应鉴定难题，创新性地应用非靶向蛋白质组学技术分析肋骨骨髓蛋白表达谱。团队通过对比创伤组与对照组的蛋白质差异，发现补体C9、纤维蛋白原和碳酸酐酶2等关键蛋白呈现时间依赖性表达模式，为骨折时间推断和复苏性骨折鉴别提供了分子标志物。该成果发表于《International Journal of Legal Medicine》，为法医实践中骨骼创伤的活体反应鉴定开辟了新途径。

　　

骨骼创伤的活体反应鉴定一直是法医病理学的核心挑战。传统组织病理学方法在骨骼组织尤其是短期存活期（围死亡期）创伤评估中存在明显局限，而皮肤和肌肉的愈合速度又远快于骨骼。肋骨骨折作为法医常见损伤，其活体反应判断常因复苏操作等因素变得复杂。面对这一困境，米兰大学的研究团队另辟蹊径，将目光投向骨骼系统中动态变化的红骨髓（rBM），结合前沿蛋白质组学技术，为这一难题带来突破性解决方案。

研究团队收集25例明确创伤时间的肋骨骨折案例和15例无胸外伤对照样本，采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术进行蛋白质组分析。通过MaxQuant软件处理质谱数据，结合功能富集分析，系统揭示了创伤后骨髓蛋白质表达的动态变化规律。

急性期蛋白的时序性表达
研究发现创伤组显著上调100种蛋白，其中急性期反应蛋白（APPs）如补体C9、纤维蛋白原（FGA、FGB、FGC）呈现特征性表达模式。补体C9在所有时间点均保持高表达，纤维蛋白原从伤后4小时开始显著增加，这些蛋白协同参与早期凝血和炎症反应，为创伤活体反应提供了明确分子证据。

细胞外基质的动态重构
胶原VI（COL6A1/A2/A3）、纤维连接蛋白（FN1）等细胞外基质蛋白（ECMPs）在伤后24-48小时显著升高，反映了从血肿形成到纤维软骨痂过渡的修复过程。这种时序性表达特征为骨折时间推断提供了新依据。

骨特异性蛋白的独特模式
碳酸酐酶2（CA2）展现出抛物线型表达趋势，伤后12小时达到峰值。作为骨代谢关键酶，CA2通过调节破骨细胞酸化微环境参与骨重塑，其表达动态揭示了骨骼对创伤的快速生物响应机制。

复苏性骨折的分子特征
值得注意的是，研究未发现复苏性骨折与其他类型肋骨创伤的蛋白质组差异，表明骨髓反应主要受生存时间而非创伤机制影响。

这项发表于《International Journal of Legal Medicine》的研究首次系统描绘了肋骨骨折后骨髓蛋白质组动态图谱，确立了补体C9、CA2等蛋白作为活体反应标志物的应用价值。其创新性在于：1）突破传统组织学局限，实现分子水平创伤鉴定；2）建立首个肋骨骨折蛋白质时序数据库；3）为围死亡期损伤鉴定提供客观标准。这些发现不仅推进了法医损伤时间推断的精准化，也为临床骨愈合研究提供了新视角。未来研究可扩大样本量验证标志物稳定性，并探索蛋白质翻译后修饰在创伤反应中的作用。