CpG-乳剂佐剂gEgl融合蛋白在小鼠中诱导的免疫原性及细胞应答研究

为解决现有带状疱疹疫苗Shingrix安全性不足和可及性受限的问题，厦门大学研究人员开发了基于gEgl融合蛋白与CpG-乳剂复合佐剂XUA09C的新型疫苗。研究表明，该疫苗在小鼠模型中诱导的抗体反应与Shingrix相当，但能产生更强的T细胞免疫应答，单细胞测序证实其可促进早期免疫激活和记忆T细胞形成，为免疫低下人群提供了更优选择。

　　

带状疱疹（HZ）是由水痘-带状疱疹病毒（VZV）再激活引起的疼痛性皮肤病，全球50岁以上人群年发病率高达11.8‰。现有疫苗Shingrix虽有效但存在两个致命缺陷：使用稀缺植物成分QS-21的AS01B佐剂导致产能受限，且约16%接种者出现严重不良反应。更棘手的是，随着免疫力下降，老年人急需能激发持久细胞免疫的疫苗——这正是当前重组蛋白疫苗的短板。

厦门大学夏宁邵团队另辟蹊径，将目光投向VZV包膜中丰度最高的gE蛋白及其搭档gI。他们巧妙设计出gEgl融合蛋白，通过CHO细胞表达系统获得正确折叠的糖基化蛋白，并搭配自主开发的XUA09C复合佐剂（MF59样乳剂+CpG1018）。这项发表于《Journal of Nanobiotechnology》的研究，首次证明gEgl融合策略能突破单一gE蛋白的免疫局限。

研究采用多组学技术联合作战：通过SEC-MALS（尺寸排阻色谱-多角度光散射）和DSC（差示扫描量热法）确认蛋白稳定性；运用scRNA-seq（单细胞RNA测序）解析免疫细胞动态；结合ELISPOT（酶联免疫斑点）和ICS（细胞内细胞因子染色）量化T细胞应答。在VZV预免疫小鼠和老年鼠模型中，疫苗性能经受住了严峻考验。

设计、纯化与表征
研究团队用(GGGGS)₄柔性接头连接gE（23-537aa）和gI（21-271aa）胞外区，HPSEC（高压尺寸排阻色谱）显示产物纯度>95%。SEC-MALS测得gEgl分子量93.4kDa，DSC揭示其熔解温度（59.2°C）显著高于单体gE（42.7°C）。LC-MS/MS鉴定出6个N-糖基化位点，这种类天然糖基化是CHO表达系统的关键优势。

免疫原性对决
在AS01B佐剂背景下，含8.3μg gEgl（等效5μg gE）的疫苗完胜Shingrix：CD4⁺ IFN-γ⁺ T细胞增加2.8倍，更惊人的是诱导出Shingrix缺乏的CD8⁺ IFN-γ⁺应答（p<0.001）。当切换至XUA09C佐剂后，中和抗体滴度提升3.3倍，且IgG2c/IgG1比值显示更强Th1极化（p<0.01）。

佐剂进化史
XUA09C的TEM电镜显示粒径均一的球形结构（PDI<0.2）。相比单独使用CpG或乳剂，复合佐剂使DC细胞活化标志物CD80⁺/CD86⁺表达量提升5.4倍（p<0.0001）。单细胞测序发现接种3天后，XUA09C组Tfh（滤泡辅助T细胞）比例较AS01B组高37%，这解释了其更强的生发中心反应。

老年保护屏障
在9月龄小鼠中，gEgl/XUA09C仍保持优势：CD4⁺ TEM（效应记忆T细胞）数量是Shingrix组的3.5倍（p<0.001）。值得注意的是，疫苗在VZV预免疫模型中中和抗体几何平均滴度达10^4.2，远超Shingrix组（10^3.9），印证了其克服"原始抗原印记"的能力。

这项研究突破了重组带状疱疹疫苗的两大瓶颈：通过gEgl融合设计拓宽了T细胞表位库，XUA09C佐剂则用可工业化生产的合成CpG替代了植物源性QS-21。单细胞数据揭示的早期APC（抗原呈递细胞）激活优势，为开发其他老年疫苗提供了通用技术平台。更令人振奋的是，该疫苗在模拟临床环境的预免疫模型中表现优异，且H&E染色显示其肝脏毒性显著低于Shingrix（ALT降低68%，p<0.01）。这些发现不仅为带状疱疹预防开辟了新路径，更为应对全球疫苗佐剂短缺危机提供了中国方案。