睾丸生殖细胞肿瘤中miR-371-373簇通过细胞外囊泡介导的细胞间通讯机制及其临床意义研究

本研究针对睾丸生殖细胞肿瘤(TGCTs)缺乏有效生物标志物的临床难题，首次系统分析了miR-371-373簇在细胞外囊泡(EVs)中的分泌特征。通过整合细胞系、组织外植体和匹配血浆样本的多维度数据，证实EVs是循环miR-371a-3p的重要载体，并揭示其与肿瘤分化状态的相关性，为TGCT液体活检提供了新的理论基础。

　　

睾丸生殖细胞肿瘤(TGCTs)是年轻男性最常见的恶性肿瘤，其发病率近年来持续上升。尽管miR-371a-3p已被开发为临床诊断标志物（除畸胎瘤外），但关于这些microRNA如何通过细胞外囊泡(EVs)参与肿瘤细胞间通讯的机制仍不清楚。来自葡萄牙波尔图肿瘤研究所等机构的研究团队在《Cell Communication and Signaling》发表论文，首次全面解析了TGCTs中miR-371-373簇的EVs分泌特征及其生物学意义。

研究采用超速离心(UC)分离EVs，结合纳米颗粒追踪分析(NTA)、透射电镜(TEM)和Western blot进行表征，通过qPCR检测miR-371-373簇和let-7e表达。样本包括9种TGCT细胞系、14对患者组织/血浆样本和10例健康对照。

结果部分：1）EVs特征验证：成功从细胞系、组织外植体和血浆中分离出大小EVs(lEVs/sEVs)，符合MISEV指南标准，TCam-2细胞系分泌效率最高；2）miRNA表达谱：2102-Ep细胞系呈现最高miR-371-373表达，与let-7e呈负相关，全反式维甲酸(ATRA)诱导分化后该簇表达下调而let-7e上调；3）临床样本分析：非畸胎瘤TGCT组织EVs中miR-371-373显著高于正常睾丸组织，血浆EV-miR-371a-3p虽能区分患者与健康人但灵敏度低于总循环miRNA；4）分化关联：畸胎瘤组织及EVs中miR-371-373缺失，验证了其与分化状态的负相关性。

结论指出：1）miR-371-373簇通过EVs从TGCT组织释放入血，但其EV特异性检测临床价值有限；2）发现"microRNA开关"现象——分化过程中miR-371-373下调伴随let-7e上调；3）首次建立TGCT-EVs研究技术流程，为探索EV介导的肿瘤微环境调控奠定基础。该研究不仅深化了对TGCT生物学行为的认识，也为开发基于EV的诊疗策略提供了新思路。