硫化氢供体NaHS通过抑制生长信号通路诱导神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的机制研究

本研究针对神经母细胞瘤治疗需求，探究外源性H2S供体NaHS的抗癌机制。通过XTT、ELISA和流式细胞术发现，NaHS通过下调HER-2/EGFR/ERK信号通路并激活caspase-3显著抑制SH-SY5Y细胞增殖，为开发新型神经母细胞瘤靶向疗法提供理论依据。

　　

神经母细胞瘤作为儿童最常见的颅外实体肿瘤，其治疗面临巨大挑战。尽管现有疗法不断进步，但高危患者预后仍不理想，迫切需要开发新型治疗策略。近年来，气体信号分子硫化氢(H₂S)在肿瘤中的双向调控作用引发关注——既能促进某些癌细胞存活，又能抑制其他肿瘤生长。这种"双刃剑"特性使得探究H₂S在神经母细胞瘤中的作用机制具有重要科学价值。

土耳其锡瓦斯库姆胡里耶特大学医学院的研究团队在《Medical Oncology》发表重要成果，首次系统阐明外源性H₂S供体NaHS通过多重机制抑制神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞生长的分子机理。研究采用19.18 mM NaHS处理细胞24小时，通过XTT法证实其显著抑制细胞活力，IC₅₀值精确测定为19.18 mM。ELISA检测显示关键生长信号分子HER-2、EGFR、ERK-1/2表达显著下调，同时凋亡标志物caspase-3水平升高。流式细胞术进一步验证NaHS诱导细胞凋亡率达统计学显著水平。

关键技术方法包括：XTT法测定细胞活力；商业ELISA试剂盒定量HER-2、EGFR、mTOR、ERK-1/2和caspase-3表达；Bradford法进行蛋白定量标准化；Muse Annexin V凋亡检测试剂盒结合流式细胞术分析凋亡率。

研究结果揭示：

1. SH-SY5Y细胞增殖被NaHS显著抑制
   XTT检测显示19.18 mM NaHS处理24小时使细胞活力明显降低，显微镜观察证实活细胞减少而凋亡细胞增多。

2. NaHS调控生长因子表达
   ELISA数据显示NaHS显著降低HER-2(p<0.05)、EGFR(p<0.01)、ERK-1/2(p<0.01)水平，但对mTOR无显著影响，提示其选择性作用于EGFR/HER-2-ERK信号轴。

3. NaHS促进细胞凋亡
   caspase-3水平显著升高(p<0.05)，流式检测显示凋亡细胞比例极显著增加(p<0.001)，证实NaHS通过激活凋亡程序发挥抗癌作用。

讨论部分深入剖析了H₂S在癌症中的"浓度依赖性双相效应"——低浓度促存活而高浓度诱导死亡。研究创新性地发现NaHS通过同时抑制促生存信号(EGFR/HER-2-ERK)和激活促凋亡途径实现抗神经母细胞瘤效果。特别值得注意的是，虽然总mTOR水平未变，但作者指出未来需检测磷酸化mTOR(p-mTOR)以更全面评估mTOR通路参与情况。与肝癌、膀胱癌等研究对比，本研究首次在神经母细胞瘤中确立NaHS通过EGFR/ERK/caspase-3轴发挥作用的分子机制。

该研究的临床意义在于：

1. 为神经母细胞瘤提供潜在新靶点：EGFR/HER-2-ERK信号轴
2. 揭示H₂S供体的精确浓度窗口(19.18 mM)
3. 提出"双重打击"治疗策略：抑制生长信号同时激活凋亡

局限性包括未检测caspase-8/9以区分凋亡途径，以及缺乏正常细胞毒性评估。作者建议未来开展体内实验，并探索NaHS与常规疗法的协同效应。这项研究为开发基于H₂S的神经母细胞瘤靶向治疗奠定了重要理论基础。