FTVI通过LncRNA HIF1A-AS2调控骨髓间充质干细胞成骨分化的机制研究

为解决骨缺损临床治疗难题，武汉第四医院骨科团队探究了α-(1,3)-岩藻糖基转移酶VI（FTVI）通过长链非编码RNA HIF1A-AS2调控骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化的机制。研究发现FTVI通过上调HIF1A-AS2促进BMSCs归巢能力和成骨分化标志物（Col I、RUNX2、OCN、BMP2、VEGF165）表达，为干细胞治疗骨缺损提供了新靶点。

　　

骨缺损是创伤、肿瘤等疾病导致的临床常见难题，传统自体骨移植存在供体有限等问题。尽管组织工程技术为治疗带来新希望，但如何提升干细胞归巢能力和成骨分化效率仍是关键瓶颈。岩藻糖基化修饰可增强干细胞功能，但其分子机制尚不明确。武汉第四医院骨科团队在《Journal of Orthopaedic Surgery and Research》发表的研究，揭示了FTVI-HIF1A-AS2轴调控干细胞成骨分化的新机制。

研究采用质粒转染技术构建FTVI过表达和HIF1A-AS2干扰的BMSCs模型，通过CCK-8检测细胞增殖，流式细胞术分析归巢标志物HECA452和CD15s，结合ALP染色、茜素红染色及Western blot等技术评估成骨分化。

【The transfection efficiency of LncRNA HIF1A-AS2】
实验证实HIF1A-AS2过表达质粒可显著提升BMSCs增殖活性（P<0.01），而干扰组则抑制增殖，提示该lncRNA具有促增殖作用。

【Identification of overexpression and interfering plasmids】
成功构建带绿色荧光标记的FTVI-pSV2-neo质粒和HIF1A-AS2干扰质粒，转染效率经RT-PCR验证。

【The effect of FTVI overexpression】
FTVI过表达使HIF1A-AS2 mRNA水平提升2.3倍（P<0.05），同时显著增强归巢标志物HECA452和CD15s表达。

【The effects on osteoblastic differentiation】
ALP染色显示FTVI组出现大量棕黑色颗粒沉淀，茜素红染色显示钙结节增加。分子水平上，成骨标志基因Col I、RUNX2及蛋白BMP2、VEGF₁₆₅表达量均显著升高（P<0.05），而干扰HIF1A-AS2后这些效应被逆转。

研究首次阐明FTVI通过上调HIF1A-AS2促进BMSCs归巢与成骨分化的双途径机制。该发现不仅解释了岩藻糖基化修饰影响干细胞功能的分子基础，更为优化骨组织工程策略提供了新思路——通过靶向调控FTVI-HIF1A-AS2轴，可能突破现有干细胞疗法在骨再生中的效率瓶颈。值得注意的是，HIF1A-AS2通过稳定HIF1-α（缺氧诱导因子1α）促进血管生成的作用，暗示该通路可能同时改善骨缺损区域的血液供应，这对大段骨缺损修复具有特殊价值。未来研究需进一步验证该机制在大型动物模型中的效果，并探索sncRNAs（小非编码RNA）如miRNA在此过程中的协同作用。