‘Oregon Spur’苹果离体快繁体系的建立及遗传稳定性评估：基于SSR与RAPD标记的验证

为解决高价值苹果品种‘Oregon Spur’易感病且传统繁殖效率低的问题，研究人员通过优化离体培养体系，建立了一套高效微繁技术：采用70%乙醇+0.2%多菌灵+1%次氯酸钠三步灭菌法（污染率≤30%），MS培养基添加0.8 mg/l BA+0.1 mg/l IBA+0.5 mg/l GA3实现42%芽萌发率，0.1 mg/l IBA诱导根系达90%成活率。经SSR和RAPD分子标记验证，再生植株遗传稳定性100%，为商业化种植提供优质种苗。

　　

这项研究为商业苹果品种‘Oregon Spur’开发了一套精准的离体快繁方案。科研人员从盆栽母株获取芽外植体，通过乙醇-多菌灵-次氯酸钠三重消毒组合拳（70%乙醇1分钟+0.2% carbendazim 20分钟+1% NaOCl 15分钟）将污染率压至30%，同时保留10%芽活力。有趣的是，六七月采集的芽表现最佳，存活率飙升至50%，萌芽率达25%。

在培养基配方优化环节，研究者发现MS基础培养基中添加0.8 mg/l 细胞分裂素(6-BA)、0.1 mg/l 生长素(IBA)与0.5 mg/l 赤霉素(GA₃)的黄金组合，配合1 g/l 聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，能让芽萌发率突破42%大关。增殖阶段沿用该激素配方，每个外植体平均爆发出5.10条新梢。当嫩枝转移至含0.1 mg/l IBA的生根培养基后，90%的枝条在3周内长出3.2条健壮根系，这些试管苗在椰糠-珍珠岩-蛭石(3:1:1)的混合基质中顺利完成驯化。

为确保克隆保真度，团队动用50个随机扩增多态性DNA(RAPD)和20个简单重复序列(SSR)分子标记进行全基因组扫描。电泳图谱显示所有再生植株与母本呈现完全一致的条带模式，证实该微繁体系能完美维持遗传稳定性。这项技术突破为苹果产业提供了可大规模复制的无毒种苗生产线，特别是解决了优质品种易退化难题。