枸杞叶化学成分及其体外抗类风湿性关节炎活性研究

本研究针对类风湿性关节炎(RA)现有治疗药物副作用大、成本高的问题，从传统药用植物枸杞(Lycium barbarum)叶中分离鉴定34种化合物（含2个新化合物），通过LPS诱导的MH7A细胞炎症模型评估其抗RA活性。结果显示化合物1-3、6等能显著抑制LDH和NO释放（化合物1对NO抑制率达46.7%），为开发新型天然抗RA药物提供了候选分子。

　　

类风湿性关节炎(RA)作为一种慢性自身免疫性疾病，其核心病理特征是滑膜成纤维细胞(FLS)的异常增殖和炎症因子过度分泌。当前临床使用的糖皮质激素和生物制剂虽有一定疗效，但存在价格昂贵、副作用显著等局限。传统中药枸杞叶在民间早有治疗关节疼痛的记载，但其抗RA的活性成分和作用机制尚未明确。这一研究空白促使中国科学院昆明植物研究所的研究团队对枸杞叶展开系统研究，相关成果发表在《Natural Products and Bioprospecting》期刊。

研究团队采用硅胶柱层析、高效液相色谱等技术从枸杞叶中分离化合物，通过核磁共振（包括¹H NMR、¹³C NMR、2D NMR）、高分辨质谱(HRESIMS)和圆二色谱(ECD)鉴定结构。采用LPS诱导的人RA滑膜成纤维细胞(MH7A)炎症模型，通过MTT法检测细胞活力，并测定一氧化氮(NO)和乳酸脱氢酶(LDH)水平评估抗炎活性。

结构鉴定结果
从枸杞叶中分离得到34个化合物，包括新发现的生物碱lycibarin A(1)和萜类lycibarin B(2)。化合物1通过ECD确定其6位碳为R构型；化合物2通过ROESY谱确定Δ^9,10和Δ^11,12为E构型，并首次报道其3位羟基取代特征。另有12个化合物（如化合物4、8-19）为首次从枸杞叶中分离。

抗RA活性研究
LPS刺激实验显示10 μg/mL浓度可使MH7A细胞活力提升至120.8%。在20 μM浓度下，化合物1-3、6等显著抑制炎症指标：

1. 细胞增殖抑制：化合物1-3使细胞活力降至112.91%-116.47%
2. NO抑制：化合物1效果最佳（抑制率46.7%），优于阳性对照
3. LDH释放抑制：化合物1降低32.8%，表明其减轻细胞膜损伤

作用机制探讨
活性化合物通过调控滑膜细胞中NO合成和LDH释放两条关键通路发挥作用。NO是RA炎症的关键介质，而LDH水平反映细胞死亡程度，两者协同作用可缓解RA病理进程。

该研究首次系统阐明枸杞叶抗RA的化学物质基础，发现lycibarin A等先导化合物具有开发为天然抗RA药物的潜力。其重要意义在于：

1. 验证传统药用经验的科学性
2. 提供结构新颖的候选药物分子
3. 为天然产物治疗自身免疫疾病研究提供新思路

研究团队特别指出，化合物1的α,β-不饱和内酯结构可能是其高活性的关键药效团，后续将深入探究其构效关系和作用靶点。这项成果不仅为RA治疗提供新选择，也为其他植物药活性成分研究建立了方法学范式。