桑酮A通过促进β-连环蛋白泛素化抑制黑色素瘤增殖与迁移的机制研究

这篇研究揭示了桑树活性成分Kuwanon A（KA）通过上调E3泛素连接酶SYVN1促进β-catenin（β-连环蛋白）泛素化降解，从而抑制黑色素瘤细胞增殖、迁移及细胞周期（G0/G1期阻滞），并在体内外实验中证实其与顺铂（CDDP）的协同增效作用，为黑色素瘤靶向治疗提供了新策略。

　　

Kuwanon A介导的黑色素瘤抑制作用机制

抗肿瘤效应验证
研究团队从桑树（Morus alba L.）28种化合物中筛选出6种抗黑色素瘤活性成分，重点解析了KA的作用。体外实验显示，KA对黑色素瘤细胞（A375、MV3）的半数抑制浓度（IC₅₀）为21.53–22.29 μmol/L，显著低于正常细胞（PIG1、HaCaT）。通过CCK-8、EdU掺入及克隆形成实验证实，KA以剂量依赖性方式抑制肿瘤细胞增殖，并诱导G0/G1期阻滞，伴随周期蛋白（CDK2/4/6、cyclin D1）下调和CDK抑制剂P27上调。

迁移抑制与分子机制
Transwell和划痕实验表明，KA降低黑色素瘤细胞穿透基底膜的能力，并下调迁移相关蛋白（MMP2/7/9、N-cadherin）。转录组分析发现Wnt通路关键基因表达受抑，进一步验证KA通过泛素-蛋白酶体系统促进β-catenin降解。添加蛋白酶体抑制剂MG132可逆转该效应，而蛋白合成抑制剂CHX加速降解，泛素化实验明确KA增强β-catenin多泛素化修饰。

靶点发现与功能验证
结合生物信息学筛选，锁定E3泛素连接酶SYVN1为KA作用靶点。KA处理后SYVN1 mRNA及蛋白水平显著升高，且其高表达与患者生存率正相关。敲低SYVN1可部分恢复β-catenin蛋白水平，并削弱KA对细胞增殖和迁移的抑制。

协同治疗与临床转化
KA与一线化疗药顺铂（CDDP）联用显示协同效应（q值≥1.15），体内实验证实联合用药较单药更显著抑制肿瘤生长（体积/重量降低），且减轻CDDP导致的体重下降。免疫组化显示联合组Ki-67和β-catenin阳性率最低，器官病理未见明显毒性，提示KA可增强CDDP疗效并改善安全性。

研究意义
该研究阐明KA通过SYVN1/β-catenin轴抑制黑色素瘤的分子机制，为天然产物联合化疗提供新思路，具有潜在临床转化价值。