前列腺素E2受体EP4激活诱导耐受性树突状细胞缓解缺血性急性肾损伤的机制研究

为解决急性肾损伤（AKI）高死亡率及缺乏有效治疗手段的问题，宁夏医科大学总医院团队通过激活前列腺素E2（PGE2</sub）-EP4通路，诱导耐受性树突状细胞（LDC）生成，显著降低促炎因子（IL-1β、TNF-α等）分泌并提升抗炎因子IL-10水平，同时抑制肾小管上皮细胞凋亡和氧化应激。该研究为缺血再灌注（I/R）相关AKI提供了新型免疫调节靶点，发表于《Scientific Reports》。

　　

急性肾损伤（AKI）是全球范围内威胁人类健康的重大疾病，每年导致约200万人死亡，其中缺血再灌注（I/R）是临床最常见的诱因。尽管医学界对AKI的关注度持续攀升，但现有治疗手段仍局限于透析支持，亟需探索更有效的干预策略。肾脏缺血时，缺氧诱导的活性氧（ROS）爆发会触发肾小管上皮细胞凋亡，而再灌注后大量浸润的免疫细胞——尤其是树突状细胞（DC）——通过释放促炎因子进一步加剧组织损伤。有趣的是，未成熟DC（imDC）在稳态下具有维持免疫耐受的特性，如何调控DC的双重免疫特性成为突破AKI治疗瓶颈的关键。

宁夏医科大学总医院的研究团队将目光投向前列腺素E₂（PGE₂）信号通路。这个脂质介质在炎症中扮演着"双面角色"：既能通过EP₄受体促进DC成熟迁移，又能诱导抗炎因子IL-10产生。为解开这个矛盾谜题，研究人员使用EP₄特异性激动剂L-902,688预处理骨髓源性DC（BMDC），成功培育出高表达CCR7却低表达成熟标志物（CD80/CD86/MHCII）的耐受性DC亚群（LDC）。这些细胞展现出惊人的"调和能力"：在细胞因子风暴中，它们将促炎因子IL-1β、TNF-α等压制到基线水平，同时将IL-10产量提升至普通DC的2倍以上。更令人振奋的是，当这些LDC与经历缺氧复氧（H/R）损伤的肾小管上皮细胞共培养时，细胞内ROS水平骤降50%，细胞迁移能力完全恢复，凋亡率降低至对照组水平。动物实验中，提前1.5小时注射EP₄激动剂的小鼠，其肾脏DC成熟度显著降低，病理学评分改善近70%，充分验证了"PGE₂-EP₄-DC"轴的肾保护价值。

研究团队运用多组学技术层层推进：通过流式细胞术分析DC表面标志物CD11c⁺/CCR7⁺表达；采用Transwell非接触共培养系统观察DC与TCMK-1细胞的互作；建立CoCl₂诱导的H/R细胞模型模拟缺血再灌注损伤；结合ELISA和Western blot检测炎症因子及EP₄/CCR7蛋白表达；最后通过小鼠双侧肾蒂夹闭模型进行体内验证。

Identification of bone marrow-derived dendritic cells
经7天培养的BMDC中CD11c⁺纯度达60%，证实成功诱导功能性DC。

Effects of the PGE₂/EP₄ signaling pathway on CCR7 levels in DCs
30μM EP₄激动剂使CCR7 mRNA表达提升3倍（p<0.01），而拮抗剂则显著抑制EP₄转录（p<0.01），证实CCR7表达受EP₄直接调控。

Effects of the PGE₂/EP₄ signaling pathway on the maturity of DCs
LDC组CD80/CD86表达较成熟DC（mDC）降低40%（p<0.05），呈现"半成熟"耐受态特征。

Effects of the PGE₂/EP₄ signaling pathway on the secretion of inflammatory factors by DCs
LDC组IL-10分泌量达mDC的2.5倍（p<0.01），而TNF-α水平仅为mDC的1/3（p<0.001），实现免疫应答极性转换。

Establishment of hypoxia-reoxygenation cell model
600μM CoCl₂处理24小时+2小时复氧可稳定诱导HIF-1α表达（p<0.0001），成功模拟肾脏I/R损伤。

Effects of different DC groups on alleviating H/R-induced damage to TCMK-1
LDC共培养使H/R后细胞凋亡率从35%降至15%（p<0.01），迁移能力恢复至正常水平80%（p<0.05）。

Protective role of PGE₂-EP₄ signaling in renal IRI
EP₄激动剂预处理使肾小管损伤评分从4.2分降至1.8分（p<0.05），KIM-1水平降低60%。

这项研究首次阐明EP₄受体激活可通过"升高CCR7-抑制成熟-促进IL-10"三联机制重塑DC功能，为临床防治AKI提供新思路：一方面，EP₄激动剂可开发为术前预防用药，减轻肾移植等手术中的I/R损伤；另一方面，耐受性DC过继疗法或成为AKI精准治疗的新选择。该发现同时解答了学界关于PGE₂在I/R中"促炎or抗炎"的长期争议，证实环境依赖性调控是决定其功能转向的关键。未来研究可进一步探索EP₄下游的cAMP/PKA信号如何协调CCR7与共刺激分子的表达差异，以及LDC诱导Treg分化的具体分子机制。