基于新表位特异性单克隆抗体鸡尾酒疗法的癌症治疗新策略

为解决肿瘤异质性导致的抗原逃逸问题，研究人员通过酵母展示(YSD)和噬菌体展示(PD)技术，开发靶向B16F10黑色素瘤新表位(neoepitope)的单克隆抗体鸡尾酒疗法。研究证实该疗法能显著抑制小鼠肿瘤生长并延长生存期，为个性化癌症治疗提供新范式。

　　

癌症治疗面临的核心挑战是肿瘤异质性——同一肿瘤内细胞表面抗原表达差异导致单一靶向疗法易失效。当前抗体药物如抗EGFR/HER2虽对部分患者有效，但面临抗原逃逸(antigenic escape)和"on-target off-tumor"毒性等问题。而肿瘤新表位(neoepitope)作为突变产生的独特靶点，虽个体间不共享，却具有高肿瘤特异性和低自身免疫风险的优势。

美国达特茅斯学院等机构的研究团队创新性地采用多靶点抗体鸡尾酒策略，通过定向进化技术从非免疫人源抗体库中筛选出靶向B16F10黑色素瘤新表位的单克隆抗体。研究发现，经Fc区GASDALIE突变(Gly²³⁶Ala/Ser²³⁹Asp/Ala³³⁰Leu/Ile³³²Glu)增强效应功能的抗体组合，可协同激活FcγRIIIa信号通路，显著提升抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和吞噬作用(ADCP)。该成果发表于《Cancer Immunology, Immunotherapy》，为突破肿瘤异质性屏障提供了新思路。

关键技术包括：1) 采用多样性达10⁹的酵母表面展示(YSD)和10¹¹的噬菌体展示(PD)文库筛选抗体；2) 通过磁珠分选(MACS)和流式分选(FACS)富集特异性克隆；3) 使用Jurkat-Lucia NFAT-CD16报告系统量化FcγRIIIa信号；4) 建立B16F10荷瘤小鼠模型评估体内疗效。

酵母展示技术筛选新表位抗体
团队针对9个B16F10突变肽段，通过3轮正负选择从scFv库中分离出4种特异性抗体(Y1-Y4)。流式检测显示这些抗体能结合B16F10细胞，但部分存在野生型肽段交叉反应。值得注意的是，抗体鸡尾酒可减少非特异性结合，暗示多靶点协同可能提高治疗窗口。

噬菌体展示技术并行开发
同步采用Fab噬菌体文库筛选获得4种抗体(P1-P4)。ELISA和免疫组化证实其结合突变肽段和肿瘤细胞的能力，其中P3E-Serpinc1在细胞实验中活性较低，可能与靶蛋白低表达有关。

效应功能优化策略
引入GASDALIE突变后，抗体FcγRIIIa信号激活能力提升10倍，吞噬活性增加3倍。特别发现Y2E-Psg25经改造后从无活性转为有效激活ADCC，凸显工程化改造价值。

体内抗肿瘤效果验证
在联合PD-1/CTLA-4免疫检查点阻断(ICB)的B16F10模型中，Fc增强型抗体鸡尾酒显著抑制肿瘤生长(p<0.05)。有趣的是，存活小鼠出现白癜风样病变，提示可能诱发抗黑色素瘤记忆免疫。

该研究建立了从新表位鉴定到抗体鸡尾酒开发的完整技术路线，其核心价值在于：1) 证实多靶点抗体协同可克服肿瘤异质性；2) 展示非免疫库快速开发个性化疗法的可行性；3) 为"一患一策"的精准医疗提供技术框架。尽管存在抗药抗体(ADA)产生等挑战，该研究通过创新性地组合定向进化、Fc工程和免疫调节，为难治性肿瘤开辟了新治疗范式。