靶向布鲁氏菌表面抗原的核酸适配体筛选与表征：结合位点鉴定及其功能研究

为解决布鲁氏菌病诊断和治疗难题，研究人员采用指数富集配体系统进化(SELEX)技术，以全菌为靶标筛选高亲和力核酸适配体。通过多菌种反选策略获得特异性适配体WS-6（Kd=16.23±5.84 nM），鉴定其靶点为外膜蛋白BamA。功能实验证实WS-6能显著抑制细菌入侵（qPCR Ct值22.34→20.64，P<0.05），为布鲁氏菌病诊疗提供新型分子工具。

　　

布鲁氏菌病——这种由布鲁氏菌(Brucella)引起的人畜共患病，每年导致全球超百万例感染，却因细菌擅长"潜伏作案"(细胞内寄生和亚临床菌血症)而常被低估。面对这个遗传多变、免疫逃逸的"狡猾对手"，科学家们祭出分子探针界的"捕手"——核酸适配体(aptamer)，通过SELEX技术(指数富集配体系统进化)展开围猎。

研究团队采用"全菌钓鱼"策略，并用根瘤菌(Rhizobium fischeri)、大肠杆菌(Escherichia coli)等作为"干扰项"进行13轮筛选，最终捕获到明星适配体WS-6。这个"分子特工"不仅具备纳米级结合力(K_d=16.23±5.84 nM)，还能耐受酸碱和高温考验。通过免疫共沉淀(Co-IP)和质谱联用技术，揭开了其靶点真容——外膜蛋白BamA(β-桶装配机器A)，分子对接实验再现了二者"精准锁钥"的结合场景。

更令人振奋的是，装载WS-6的脂质体犹如"智能导弹"，在细胞实验中使细菌入侵量显著下降(qPCR Ct值从22.34降至20.64，P<0.05)。突变实验揭示GC富集区是结合关键，而截短体BamAK仍保留结合能力，为诊断试剂的微型化提供线索。这项研究不仅为布鲁氏菌病诊疗送上"分子钥匙"，更开辟了适配体靶向治疗的新路径。