分层诊断方案联合快速分子检测技术实现成人型弥漫性胶质瘤的精准分型

为解决成人型弥漫性胶质瘤分子分型检测流程复杂、耗时长的问题，复旦大学附属华山医院等团队提出以IDH和TERTp突变为核心的分层诊断方案，并开发35分钟快速检测技术。研究通过回顾性队列（n=746）和前瞻性多中心试验（n=296）验证，证实该方案术中诊断准确率达84%，术后提升至92.9%，显著优于传统WHO CNS5标准。该成果发表于《BMC Medicine》，为胶质瘤的精准诊疗提供了高效实用的技术路径。

　　

成人型弥漫性胶质瘤是中枢神经系统最具侵袭性的肿瘤之一，其诊断长期依赖组织学特征，但传统方法存在主观性强、预后预测不准的局限。随着WHO CNS5分类的推出，IDH突变、1p/19q共缺失等分子标志物成为诊断金标准，但复杂的技术要求（如荧光原位杂交检测1p/19q）和长达数周的检测周期，阻碍了临床普及。更棘手的是，术中冰冻切片难以区分低级别胶质瘤与反应性胶质增生，影响手术决策。

针对这些挑战，复旦大学附属华山医院联合宁夏医科大学总医院等机构的研究团队开展了一项突破性研究。他们提出假说：IDH和端粒酶逆转录酶启动子（TERTp）突变可作为简化分层的核心指标，并开发出35分钟快速检测技术，实现从术后到术中的诊断场景拓展。

研究采用了两大关键技术：一是基于ARMS（扩增阻滞突变系统）和锁核酸探针的qPCR快速检测，可同时覆盖IDH1/2和TERTp所有热点突变；二是全基因组低深度测序（sWGS）用于验证拷贝数变异（CNV）。样本来源于746例回顾性队列和296例前瞻性多中心队列，所有检测均通过Sanger测序和靶向测序交叉验证。

回顾性队列揭示分子标志物分布规律
通过分析746例成人型弥漫性胶质瘤发现：98.6%的IDH突变型少突胶质细胞瘤同时存在TERTp突变，而IDH突变型星形细胞瘤仅2.5%携带该突变（K=0.96, P<0.001）。在IDH野生型胶质母细胞瘤中，91.8%的EGFR扩增或+7/-10病例伴随TERTp突变，提示后者可作为前者的替代标志物。

前瞻性验证分层诊断效能
术中应用快速检测技术后，84%的病例（224/296）实现即时分型，包括61例星形细胞瘤、59例少突胶质细胞瘤和104例胶质母细胞瘤。结合术后永久切片分析，准确率提升至92.9%，其中26例初始未确诊的IDH/TERTp野生型病例经组织学确认后归为胶质母细胞瘤。剩余20例通过第二层标志物（如H3K27M、CDKN2A/B纯合缺失）完成分型。

特殊病例的分子特征
研究深入分析了8例IDH突变但缺乏1p/19q共缺失或TERTp突变的特殊病例。甲基化测序显示其中3例具有典型少突胶质细胞瘤特征，而全基因组测序（WGS）发现1例存在1p35.2-p21.1区拷贝中性杂合缺失（LOH），揭示了传统FISH检测可能遗漏的复杂基因组事件。

这项研究开创性地构建了以IDH/TERTp突变为第一层、CNV检测为第二层的分层诊断体系。其临床价值体现在三方面：一是将分子诊断时间从数周缩短至35分钟；二是术中诊断准确率媲美WHO CNS5标准（AUC=0.915）；三是检测成本降至20美元/例，适合基层推广。值得注意的是，该方案对IDH突变型星形细胞瘤的分级仍需依赖CDKN2A/B检测，这提示未来需探索更便捷的分级标志物。

论文发表于《BMC Medicine》的突破性在于，首次将分子分层理念贯穿于胶质瘤诊疗全流程。正如通讯作者Jinsong Wu强调，该技术使"精准手术"成为可能——术中明确分子边界可指导最大范围安全切除。随着BRAF V600E等标志物的纳入，这套方案有望进一步拓展至儿童胶质瘤诊断领域。