肺M2巨噬细胞来源的细胞外囊泡通过lncRNA 4930474H06Rik调控2型固有淋巴细胞功能加剧过敏性气道炎症

为解决过敏性气道炎症中M2巨噬细胞与ILC2s（2型固有淋巴细胞）互作机制不明的问题，研究人员通过EVs（细胞外囊泡）分离、RNA测序和功能验证，发现M2 EVs通过递送lncRNA 4930474H06Rik激活ILC2s的糖代谢和炎症因子分泌，为哮喘治疗提供新靶点。

　　

哮喘是全球范围内严重的慢性呼吸道疾病，其特征是Th2（辅助性T细胞2型）介导的炎症反应和气道高反应性。近年来，研究发现2型固有淋巴细胞（ILC2s）在哮喘发病中扮演关键角色，它们能快速分泌大量IL-5和IL-13等2型细胞因子，招募嗜酸性粒细胞并加剧炎症。尽管已知巨噬细胞与ILC2s存在交互，但M2型巨噬细胞如何通过细胞外囊泡（EVs）调控ILC2s的机制仍是未解之谜。

为解决这一问题，皖南医学院第一附属医院的研究团队在《Experimental & Molecular Medicine》发表研究，首次揭示肺M2巨噬细胞来源的EVs通过递送长链非编码RNA 4930474H06Rik，直接激活ILC2s并重塑其糖代谢状态，从而加剧过敏性气道炎症。这一发现不仅阐明了先天免疫与适应性免疫的协同作用机制，还为靶向lncRNA的哮喘治疗策略提供了理论依据。

研究团队采用多项关键技术：通过GW4869抑制EVs生成和氯膦酸盐脂质体清除巨噬细胞建立功能缺失模型；利用差速超速离心法分离肺组织和骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）的EVs；结合RNA测序筛选出关键lncRNA 4930474H06Rik；通过RNA荧光原位杂交（FISH）和 Seahorse能量代谢分析等技术解析分子机制。

研究结果分为五个部分：

1. GW4869抑制ILC2s活化：通过抑制EVs分泌酶nSMase2，显著降低ILC2s增殖和IL-5/IL-13产生，证实EVs对ILC2s功能的必要性。
2. M2 EVs表征与功能验证：透射电镜和纳米颗粒追踪显示EVs直径约115 nm，携带CD63/CD81标志物。M2 EVs高表达CD206和Arg-1（精氨酸酶1），回输可逆转巨噬细胞缺失导致的ILC2s功能抑制。
3. 多途径内化机制：动态蛋白抑制剂dynasore阻断95%的M2 EVs内化，表明ILC2s主要依赖网格蛋白介导的内吞途径摄取EVs。
4. 间接调控网络：21.5%的肺巨噬细胞和9%的CD4⁺ T细胞可内化M2 EVs，促进M2极化和Th2反应，形成正反馈环路。
5. lncRNA 4930474H06Rik的核心作用：该lncRNA在M2 EVs中高表达，沉默后使ILC2s糖代谢关键酶GLUT1和PKM2表达上调，同时降低GATA3（调控ILC2s分化的转录因子）蛋白水平，减轻气道炎症。

结论表明，M2 EVs通过递送4930474H06Rik，以“直接激活+间接放大”的双重模式调控ILC2s功能。该lncRNA通过抑制糖代谢重编程维持ILC2s的2型炎症特性，其同源基因在人类M2 EVs中同样保守。研究创新性地将EVs通讯、代谢重编程和lncRNA调控网络整合，为哮喘的精准干预提供了新思路——靶向4930474H06Rik可能同时阻断ILC2s活化和巨噬细胞M2极化，具有双重治疗潜力。未来需进一步探索该lncRNA在临床样本中的表达谱及其与哮喘严重程度的相关性。