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为解决肝细胞癌（HCC）顺铂耐药及高死亡率问题，研究人员开展顺铂与 palbociclib（C+P）联合抗 HCC 研究。发现 C+P 可下调 Hsp90、β-catenin、PI3K/AKT/mTOR 通路基因，诱导凋亡和细胞周期 arrest，抑制迁移，为克服顺铂耐药提供新策略。
肝癌作为全球重大健康挑战，其高死亡率与复发率一直困扰医学界。顺铂虽为肝癌化疗常用药，但肿瘤细胞易产生耐药性，导致治疗失败。如何克服顺铂耐药、提高肝癌治疗效果成为亟待解决的难题。在此背景下，埃及英国大学（The British University in Egypt）的研究人员开展了顺铂与 palbociclib 联合应用抗肝细胞癌的研究，相关成果发表在《Scientific Reports》。
研究人员采用多种关键技术方法开展研究。通过 MTT 法检测细胞活力，计算 IC50 值及组合指数（CI）以评估药物协同效应；利用流式细胞术进行 Annexin V/PI 凋亡检测和细胞周期分析；运用 RT-qPCR 检测相关基因表达；通过 Western blot 分析蛋白表达；借助划痕实验评估细胞迁移能力；还基于 UCSC Xena 平台获取 TCGA HCC 样本数据，进行生存分析。
细胞活力与药物协同效应
MTT 实验显示，顺铂与 palbociclib 联合处理 HepG2 和 Huh-7 细胞 48 小时后，HepG2 细胞中 palbociclib 的 IC50 从 1.016μM 降至 0.293μM，CI 为 0.617，呈协同效应；Huh-7 细胞中 IC50 从 1.336μM 降至 0.463μM，CI 为 0.8，表现为 additive 效应，表明两药联合在不同细胞系中均能增强抑制细胞生长的效果。
细胞凋亡诱导作用
Annexin V/PI 凋亡检测表明，在 HepG2 细胞中，palbociclib 单药诱导的凋亡细胞比例最高，C+P 组合次之，均显著高于顺铂单药；Huh-7 细胞中，C+P 组合诱导的凋亡和坏死比例最高。这说明两药联合能有效诱导肝癌细胞凋亡，且效果优于单药。
细胞周期阻滞效应
细胞周期分析显示，palbociclib 单药可使 HepG2 和 Huh-7 细胞显著阻滞于 G0/G1 期，顺铂单药则诱导 S 期阻滞，C+P 组合使细胞在 S 期和 G0/G1 期均出现阻滞，提示两药通过不同机制影响细胞周期，共同发挥细胞毒作用。
细胞迁移抑制作用
划痕实验结果显示，24 小时时，palbociclib 单药及 C+P 组合均显著抑制 HepG2 和 Huh-7 细胞的伤口愈合，HepG2 细胞中 C+P 组合在 48 小时仍有抑制作用，表明两药联合可有效抑制肝癌细胞的迁移能力。
基因与蛋白表达调控
RT-qPCR 结果显示，C+P 组合显著下调 Hsp90、β-catenin、PI3K、AKT1、mTOR 等基因表达，上调 PTEN 蛋白表达（仅在 HepG2 细胞中）。Western blot 证实，C+P 组合可降低磷酸化 AKT（P-AKT）水平，进一步表明其对 PI3K/AKT/mTOR 通路的抑制作用。
生存分析
基于 TCGA 数据的生存分析表明，PTEN 高表达且 PI3K/AKT/mTOR 通路低表达、β-catenin 与 BCL2 或 Hsp90 低表达的 HCC 患者生存概率更高，提示这些分子可作为预后标志物，进一步支持 C+P 组合通过调控相关通路发挥抗肿瘤作用。
综上所述，该研究首次证实顺铂与 palbociclib 联合在肝癌细胞中具有显著的协同抗肿瘤效应，其机制可能与抑制 Hsp90、激活 PTEN、抑制 PI3K/AKT/mTOR 和 Wnt/β-catenin 通路、诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞有关。研究结果为克服肝癌顺铂耐药提供了新的治疗策略，有望为临床肝癌治疗提供新思路。同时，不同细胞系对联合治疗的反应差异提示未来需进一步探索个性化治疗方案，以优化临床应用效果。
