非小细胞肺癌中MET外显子14跳跃突变的3年筛查经验：优化检测策略与临床治疗启示

为解决非小细胞肺癌(NSCLC)中MET外显子14跳跃突变检测难题及治疗选择困境，法国巴黎癌症研究所团队通过多中心队列研究(1143例患者)，开发DNA-RNA测序(NGS)联合片段分析的多模态检测策略，发现4%患者携带MET突变，其中42%存在TP53/PIK3CA共突变。研究证实MET抑制剂(ORR 44%)疗效优于免疫治疗(ICI)(ORR 30%)，且PD-L1高表达(>50%)与ICI疗效无相关性，为临床精准诊疗提供重要依据。

　　

肺癌作为全球癌症死亡的首要原因，非小细胞肺癌(NSCLC)占其85%。近年来，靶向治疗革新了肺癌治疗格局，但MET外显子14(METex14)跳跃突变这一罕见驱动变异(发生率1-4%)却面临双重挑战：一方面，其高度异质性的剪接位点突变易被常规DNA测序漏检；另一方面，尽管PD-L1高表达在METex14肿瘤中占比高达67%，患者对免疫治疗(ICI)的反应却普遍不佳。这种"高PD-L1低响应"的矛盾现象，加上MET抑制剂(如卡马替尼)的临床应用，使得METex14检测成为治疗决策的关键瓶颈。

法国巴黎癌症研究所的R.Ben Dhiab团队在《Scientific Reports》发表了一项历时3年的多中心研究。他们通过1143例NSCLC患者的系统筛查，开发了DNA-RNA测序(NGS)与片段分析联用的创新检测策略，并首次揭示了METex14突变患者的临床特征、共突变谱及治疗响应规律。

研究采用两种关键技术：1)基于FFPE(福尔马林固定石蜡包埋)样本的DNA/RNA同步提取技术，结合离子 torrent平台的扩增子测序(Ion AmpliSeq)和Archer Analysis的RNAseq分析；2)针对大片段缺失开发的荧光标记片段分析法，可检测≥10%变异频率的41-65bp缺失。临床数据来自46例METex14阳性患者的电子病历回顾。

优化METex14剪接位点突变检测
通过两阶段策略优化：第一阶段(2018-2020年)采用DNA-NGS+片段分析，在518例中检出29例MET突变，其中2例大片段缺失(41bp/65bp)被片段分析"挽救"；第二阶段(2020-2021年)升级为DNA-RNA-NGS联用，在625例中再检出17例，另有2例经RNAseq补充检出(图1)。最终共鉴定46例(4%)，包含14种热点突变(30%)和32种剪接区缺失(70%)，证明多模态检测的必要性(图2)。

共突变与临床特征
42%患者存在共突变，以TP53(24%)和PIK3CA(9%)为主。患者中位年龄79岁(58-95)，48%为女性，46%为非吸烟者。组织学显示73.4%为腺癌，8.6%为肉瘤样癌——后者METex14发生率是常规腺癌的3倍。PD-L1>50%的占比显著高于野生型组(p=0.0012)，但吸烟者(40包年/年)的PD-L1表达反而更低。

治疗响应模式
15例接受MET抑制剂(11例克唑替尼，7例卡马替尼)的患者中，客观缓解率(ORR)44%，中位无进展生存期(PFS)5.5个月。值得注意的是：1)合并MET扩增患者出现近完全缓解(-75%肿瘤缩小)；2)卡马替尼组3例克唑替尼经治患者PFS仅3个月，提示序贯治疗疗效受限(图4)。13例接受ICI治疗者ORR仅30%，但呈现"吸烟者悖论"——6例吸烟者ORR达67%(4/6)、中位PFS10.3个月，显著优于非吸烟者(0/7，PFS2.1个月，p=0.016)。两例长期响应(34.4/55.5个月)均为重度吸烟者(表4)。

这项研究确立了METex14检测的黄金标准：RNAseq可弥补DNA-NGS对大片段缺失的漏检，而片段分析是低成本替代方案。临床启示尤为深刻：1)老年(>75岁)和非吸烟患者应优先筛查METex14；2)PD-L1高表达不能预测ICI疗效，吸烟史才是潜在生物标志物；3)MET抑制剂应作为一线选择，尤其避免ICI后序贯靶向治疗(易致肝毒性)。正如作者强调，这种"DNA-RNA双轨制"检测策略(图6)不仅适用于METex14，还可同步检测其他可靶向变异(如ALK/ROS1融合)，为NSCLC精准诊疗提供一体化解决方案。