热带假丝酵母GY8中苯酚羟化酶的基因克隆、酚响应转录谱分析及重组蛋白功能表征

为解决苯酚生物降解机制的关键问题，研究人员对热带假丝酵母(Candida tropicalis) GY8的苯酚羟化酶(PH)展开系统研究。通过RT-qPCR和重组蛋白表达技术，发现CtPHE2基因表达量显著高于CtPHE1(p<0.01)，且其编码蛋白催化活性更强，HPLC证实酚类转化为儿茶酚的过程。该研究为环境污染物降解提供了重要分子靶点。

　　

在这项突破性研究中，热带假丝酵母(Candida tropicalis) GY8菌株的苯酚羟化酶(Phenol hydroxylase, PH)成为解密酚类代谢通路的钥匙。科研团队通过精妙的实验设计，先让菌株在苯酚诱导下培养，随后用高效液相色谱(HPLC)捕捉到酚类转化为儿茶酚的关键证据。

分子层面更是精彩纷呈——两个PH编码基因CtPHE1和CtPHE2浮出水面。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)数据显示，CtPHE2像个"高产作家"，在5/10/15小时时间点的表达量始终碾压CtPHE1(p<0.01)。当把这些基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3)中时，重组蛋白CtPHE2展现出更强的催化"战斗力"。

特别值得注意的是，酶活峰值出现在培养15小时时(p<0.01)，而基因转录高峰却提前到10小时，这种时差现象暗示着可能存在复杂的转录后调控机制。这些发现不仅为环境污染物处理提供了新思路，更绘制了一幅微生物分解有毒化合物的分子蓝图。