三七皂苷Ft1通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路诱导溶酶体细胞死亡和凋亡：肝细胞癌治疗新策略

本研究针对肝细胞癌(HCC)治疗困境，发现传统中药三七提取物Notoginsenoside Ft1(NFt1)通过双重机制发挥抗癌作用：一方面抑制PI3K/AKT/mTOR通路激活转录因子EB(TFEB)，另一方面下调KRAS/MAPK信号通路。研究结合转录组测序(RNA-seq)和体内外实验证实，NFt1可特异性诱导HCC细胞溶酶体死亡(lysosomal cell death)和凋亡，同时对正常肝细胞THLE-2无显著毒性，为HCC靶向治疗提供了新型候选药物。

　　

肝细胞癌(HCC)是全球癌症相关死亡的主要原因之一，晚期患者治疗选择有限且预后极差。尽管近年来靶向治疗取得进展，但耐药性和肿瘤异质性仍是重大挑战。传统中药因其多靶点作用特点，在抗癌药物开发中展现出独特优势。其中，三七(Panax notoginseng)作为经典中药材，已被证实具有多种药理活性，但其活性成分Notoginsenoside Ft1(NFt1)在HCC中的具体机制尚未阐明。

为探索NFt1的抗癌潜力，来自韩国科学技术研究院的研究团队开展了系统研究。通过整合转录组学、分子生物学和动物实验等多学科方法，揭示了NFt1通过双重通路抑制HCC生长的创新机制。相关成果发表在《Biomedicine》杂志，为HCC治疗提供了新的策略视角。

研究采用的主要技术包括：1) RNA测序(RNA-seq)分析基因表达谱；2) 流式细胞术检测细胞凋亡；3) 免疫印迹(Western blot)分析关键蛋白表达；4) 报告基因系统评估TFEB转录活性；5) HepG2异种移植小鼠模型验证体内疗效。

【3.1. Effects of notoginsenoside Ft1 on HCC cell lines】
通过筛选37种三七皂苷，发现NFt1对HepG2、Huh7等HCC细胞系具有显著抑制作用(IC₅₀=35.2-58.9 μM)，而对正常肝细胞THLE-2毒性较低(IC₅₀=82.2 μM)。NFt1处理可剂量依赖性抑制集落形成，激活caspase-3/8/9等凋亡标志物，流式细胞术显示早期和晚期凋亡细胞比例显著增加。

【3.2. Effects of notoginsenoside Ft1 on HepG2 Xenograft in vivo model】
在HepG2异种移植模型中，25/50 mg/kg NFt1治疗3周显著减小肿瘤体积和重量。组织学分析显示NFt1组出现典型凋亡特征如核固缩和核碎裂，TUNEL检测证实凋亡细胞数量明显增加。

【3.3. Transcriptomic profiling of notoginsenoside Ft1 on HCC cell line】
RNA-seq分析发现NFt1处理导致6916个基因表达显著改变，其中下调基因富集于MAPK通路，包括关键癌基因FOS、BRAF、RARA等。同时，溶酶体相关基因如CTSB、CTSD、LAMP1/2等显著上调。

【3.4. Notoginsenoside Ft1 inhibits the AP-1 activation via suppressing KRAS, FOS and JUND expression】
NFt1剂量依赖性降低KRAS、c-Fos、JUND蛋白水平，抑制ERK1/2和ELK-1磷酸化，但增加c-Jun磷酸化。报告基因实验证实NFt1显著抑制AP-1转录活性，动物实验也观察到KRAS/MAPK通路蛋白的同步下调。

【3.5. Notoginsenoside Ft1 accelerates the lysosomal cell death】
溶酶体死亡标志物CTSB/CTSD活性显著增强，自噬相关蛋白LC3B-II和p62积累。免疫印迹显示促凋亡蛋白Bax上调而抗凋亡蛋白Bcl2下调，提示溶酶体-线粒体凋亡通路协同作用。

【3.6. Notoginsenoside Ft1 enhances TFEB transactivity regulating the lysosomal cell death】
机制研究表明，NFt1通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路，减少TFEB Ser211位点磷酸化，促进其核转位。报告基因系统证实TFEB转录活性增强，驱动下游溶酶体基因表达。动物实验同样观察到TFEB去磷酸化水平增加。

这项研究首次系统阐明了NFt1抗HCC的双重机制：既通过抑制KRAS/MAPK/AP-1通路阻断肿瘤增殖，又通过PI3K/AKT/mTOR-TFEB轴激活溶酶体死亡程序。特别值得注意的是，NFt1对癌细胞的选择性杀伤作用及其多靶点特性，为克服HCC耐药提供了新思路。从转化医学角度看，该研究不仅为中药活性成分的现代化研究提供了范本，也为开发基于溶酶体死亡机制的创新抗癌策略奠定了理论基础。未来研究可进一步优化NFt1的给药方案，并探索其与其他靶向药物的联合治疗效果。