脑膜炎球菌B群表面因子H结合蛋白表达定量检测(MEASURE)的实验室间精密度与可重复性研究

为解决脑膜炎球菌B群(MenB)疫苗效力评估中人血清杀菌抗体(hSBA)检测的局限性，研究人员开发了基于流式细胞术的MEASURE检测法，用于定量MenB菌株表面因子H结合蛋白(fHbp)表达水平。通过跨实验室验证，证实该方法在预测MenB-fHbp疫苗诱导抗体敏感性方面具有>97%的一致性，且总相对标准偏差≤30%，为全球脑膜炎监测提供了标准化工具。

　　

脑膜炎球菌B群(MenB)引发的侵袭性疾病(IMD)具有高致死率和严重后遗症，而现有疫苗评估的金标准——人血清杀菌抗体(hSBA)检测面临人血清样本稀缺、操作复杂等瓶颈。更棘手的是，MenB表面蛋白疫苗的覆盖范围受靶抗原fHbp的基因多态性和表达量差异影响，传统方法难以快速评估数千种变异株。为此，辉瑞公司开发的MEASURE检测法通过流式细胞术定量fHbp表面表达，此前已建立MFI>1000的阈值与hSBA杀菌率91.2%的关联性。

为验证该技术的普适性，辉瑞联合英国卫生安全局(UKHSA)和美国疾控中心(CDC)开展三中心研究。研究团队选取42株涵盖fHbp序列多样性的MenB菌株，采用标准化流程培养后，用交叉反应性单抗MN86-994-11-1标记fHbp，通过流式细胞仪获取MFI值。关键步骤包括：GC培养基振荡培养至对数生长期(A₆₅₀≈0.3)、多克隆血清阻断非特异性结合、设置同型对照排除背景干扰。

Results部分显示：

1. 三实验室MFI值几何均值高度一致，以1000 MFI为界的分组一致性达97%以上；
2. 各实验室内部精密度(总RSD)均<30%，符合预设标准；
3. 与辉瑞两年前历史数据比较，CDC和UKHSA结果均保持稳定。

Discussion强调：

1. MEASURE检测在保留fHbp天然构象的同时，规避了hSBA对补体依赖性的限制；
2. 跨平台可重复性证实该方法适用于全球MenB流行株监测，尤其对非洲脑膜炎带国家具有特殊价值；
3. 结合既往1814株全球菌株数据，证实91.4%的临床分离株fHbp表达超过杀菌阈值，为MenB-fHbp(Trumenba?)的广谱保护提供佐证。

该研究发表于《Diagnostic Microbiology and Infectious Disease》，首次系统验证了MEASURE检测作为"免疫相关性替代终点"的可靠性。特别值得注意的是，即使对于表达量极低(<100 MFI)的PMB2907等菌株，三实验室仍能保持检测一致性，这对疫苗逃逸株的早期预警至关重要。随着WHO将fHbp纳入MenB疫苗抗原优先清单，该技术有望成为继多糖血清分型后的新一代分子分型标准。