靶向降解ALK蛋白的PROTAC分子WZH-17-002克服劳拉替尼耐药复合突变的研究

针对ALK TKI（酪氨酸激酶抑制剂）序贯治疗导致的复合突变耐药难题，研究人员通过筛选获得新型ALK抑制剂WZH-15-125，并以此为基础设计出高效降解ALK蛋白的PROTAC分子WZH-17-002（DC50=25 nM）。该分子在G1202R/L1196M突变小鼠模型中展现出优于劳拉替尼的体内药效，为克服ALK TKI耐药提供了新策略。

　　

肺癌治疗领域，ALK（间变性淋巴瘤激酶）基因重排是非小细胞肺癌（NSCLC）的重要驱动因素。尽管三代ALK酪氨酸激酶抑制剂（TKI）如劳拉替尼（lorlatinib）已取得临床成功，但约25%-50%患者因获得性复合突变（如G1202R/L1196M）而治疗失败。这类突变对现有ALK TKI均产生耐药性，成为临床亟待解决的难题。

为突破这一瓶颈，厦门大学等机构的研究团队开展了一项创新性研究。他们首先通过高通量筛选发现先导化合物WZH-15-125，该分子能有效抑制包括G1202R/L1196M在内的多种耐药突变。进一步，研究人员利用蛋白降解靶向嵌合体（PROTAC）技术，以WZH-15-125为弹头设计出新型降解剂WZH-17-002。实验显示，该分子对ALK蛋白的半数降解浓度（DC₅₀）达25 nM，并在小鼠模型中显著抑制肿瘤生长且延缓耐药性产生。相关成果发表于《European Journal of Medicinal Chemistry》。

关键技术方法
研究采用EML4-ALK转染的Ba/F3细胞模型筛选抑制剂；通过核磁共振（NMR）和高分辨质谱（HRMS）验证化合物结构；利用细胞热转移实验（CETSA）评估药物-靶点结合；采用免疫印迹（Western blot）分析蛋白降解效果；最后通过皮下移植G1202R/L1196M突变肿瘤的小鼠模型评价体内药效。

研究结果

1. INTRODUCTION
   阐明ALK重排NSCLC的治疗困境，指出复合突变是导致三代TKI失效的主因。

2. CHEMISTRY
   详细描述WZH-15-125的合成路线（Scheme 1），涉及S_NAr（亲核芳香取代）和胺化反应，以及PROTAC连接子的优化策略（Scheme 2）。

3. RESULTS AND DISCUSSION

• WZH-15-125对Ba/F3细胞系中12种耐药突变均显示纳摩尔级抑制活性
• PROTAC分子WZH-17-002通过泛素-蛋白酶体系统降解ALK蛋白，DC₅₀较同类分子提高10倍
• 在移植瘤模型中，WZH-17-002组小鼠肿瘤体积较劳拉替尼组减少68%（p<0.001）

1. CONCLUSIONS
   证实PROTAC策略可同时解决靶点抑制和耐药突变两大难题，为临床转化提供新思路。

意义与展望
该研究首次将PROTAC技术应用于ALK复合突变耐药领域，突破传统TKI"抑制而不清除"的局限。WZH-17-002通过降解ALKG1202R/L1196M蛋白，实现"斩草除根"式治疗，其DC₅₀值达到同类最优水平。值得注意的是，该分子还能预防耐药性产生，这为延长患者无进展生存期带来希望。未来研究将聚焦于临床前毒理评估和剂型优化，推动其向临床试验迈进。