DAPL1通过调控TGF-β/MITF通路抑制视网膜色素上皮细胞上皮-间质转化的机制研究及其治疗潜力

视网膜色素上皮细胞（RPE）的上皮-间质转化（EMT）是增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）和年龄相关性黄斑变性（AMD）等致盲性疾病的关键因素。本研究揭示了DAPL1通过调控TGF-β/MITF信号通路抑制RPE-EMT的分子机制，并通过基因治疗（MITF过表达）和药物干预（异荭草素）成功逆转Dapl1?/?小鼠的病理表型，为相关视网膜疾病提供了潜在治疗策略。

　　

视网膜疾病是全球致盲的主要原因，其中增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）和年龄相关性黄斑变性（AMD）的发病机制与视网膜色素上皮细胞（RPE）的上皮-间质转化（EMT）密切相关。当RPE细胞失去极性、屏障功能破坏并转分化为间质细胞时，会引发视网膜结构紊乱和功能丧失。尽管已知转化生长因子-β（TGF-β）等通路参与调控EMT，但具体分子机制尚未阐明。尤其值得注意的是，死亡相关蛋白样1（DAPL1）在人类遗传学研究中被发现与AMD相关，但其在RPE-EMT中的作用机制仍是未解之谜。

温州医科大学眼视光学院的研究团队通过构建Dapl1^?/?小鼠模型，结合细胞实验和临床前治疗研究，首次揭示了DAPL1-TGF-β-MITF调控轴在RPE-EMT中的核心作用。研究发现，DAPL1缺失会激活TGF-β信号、抑制小眼畸形相关转录因子（MITF）表达，从而促进EMT进程；反之，过表达MITF或使用植物黄酮苷异荭草素（Isoviolanthin）干预可有效逆转这一病理过程。该成果发表于《Experimental Eye Research》，为靶向调控EMT的视网膜疾病治疗提供了新思路。

研究采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Dapl1^?/?小鼠，通过免疫荧光、Western blot等技术分析EMT标志物表达；利用视网膜脱离模型模拟PVR病理进程；采用腺病毒载体进行MITF基因治疗；并从传统草药中分离异荭草素进行药效评价。

DAPL1在RPE细胞间质-上皮转化中高表达且与TGF-β信号下调相关
通过培养ARPE-19细胞发现，持续2周培养的细胞呈现间质-上皮转化（MET）特征：上皮标志物E-cadherin升高而间质标志物α-SMA降低。此时DAPL1表达显著上调，同时TGF-β通路关键分子（p-SMAD2/3、ZEB1）表达下降，提示DAPL1可能通过抑制TGF-β信号维持RPE上皮表型。

DAPL1缺失通过TGF-β/MITF通路促进EMT
在Dapl1^?/?小鼠中，RPE细胞出现EMT典型特征：ZO-1和MITF表达降低，α-SMA和纤维连接蛋白增加。机制上，DAPL1缺失导致SMAD2/3磷酸化增强，MITF转录活性受抑。在细胞实验中，敲低DAPL1可重现上述表型，而过表达DAPL1则能抵抗TGF-β诱导的EMT。

靶向干预TGF-β/MITF通路的治疗潜力
研究团队通过双管齐下的策略验证治疗可行性：① 在Dapl1^?/?小鼠中过表达MITF，可恢复RPE上皮特性并预防PVR相关视网膜脱离；② 使用异荭草素处理可剂量依赖性地抑制TGF-β信号、上调MITF，使实验性PVR发生率降低60%。

该研究不仅阐明DAPL1作为TGF-β/MITF通路"刹车分子"的生物学功能，更创新性地提出：针对遗传缺陷（如DAPL1缺失）导致的视网膜疾病，可通过调控下游关键节点（MITF）或使用天然化合物进行干预。值得注意的是，异荭草素作为传统草药成分，其明确的作用机制为中药现代化研究提供了范例。从临床转化角度看，该发现为PVR和AMD等疾病的精准治疗开辟了新途径——既可针对特定基因缺陷开发基因疗法，也可通过筛选TGF-β/MITF调节剂开发小分子药物。研究还提示，监测RPE细胞中DAPL1-MITF表达水平可能成为评估疾病进展的新型分子标志物。