Isodon leucophyllus中新型二萜类化合物leucophyllusins A-H的发现及其生物活性研究

研究人员从Isodon leucophyllus中分离出8种新型二萜类化合物（leucophyllusins A-H）及19种已知类似物，通过1D/2D NMR、HRESIMS和量子化学计算解析结构，并评估其对AA诱导的血小板聚集和LPS刺激的RAW264.7细胞NO生成的抑制作用，虽未发现显著活性，但为天然药物开发提供了新分子实体。

　　

在天然药物化学领域，植物次生代谢产物一直是发现先导化合物的重要来源。二萜类化合物因其结构多样性和显著的生物活性备受关注，但许多药用植物中仍存在大量未鉴定的二萜成分。Isodon leucophyllus作为唇形科香茶菜属植物，其化学成分与药理潜力尚未充分挖掘。目前，炎症和血栓相关疾病治疗面临药物靶点单一、副作用明显等问题，亟需从天然产物中寻找新型作用机制的活性分子。

为系统研究Isodon leucophyllus的药用价值，国内某研究机构的研究人员对其地上部分进行了化学成分分离与活性评价。研究团队通过多种色谱技术分离得到8个新二萜（leucophyllusins A-H）和19个已知化合物，涵盖松香烷型(abietane)、海松烷型(pimarane)和对映-贝壳杉烷型(ent-kaurane)结构类型。借助核磁共振（1D/2D NMR）、高分辨电喷雾质谱（HRESIMS）及量子化学计算（包括电子圆二色谱ECD计算），首次明确了新化合物的平面结构与绝对构型。尽管体外活性筛选显示这些化合物对花生四烯酸（AA）诱导的血小板聚集和脂多糖（LPS）刺激的RAW264.7巨噬细胞一氧化氮（NO）生成均无显著抑制作用，但该研究为二萜类化合物的结构多样性提供了重要补充，相关成果发表于《Fitoterapia》。

关键技术方法
研究采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱和高效液相色谱（HPLC）分离化合物；通过核磁共振（¹H NMR、¹³C NMR、HSQC、HMBC）和质谱（HRESIMS）解析结构；利用量子化学计算（包括TDDFT-ECD）确定绝对构型；采用比浊法检测血小板聚集，Griess法测定NO含量评价活性。

研究结果

1. 化学成分分离与鉴定
   从植物甲醇提取物中分离得到27个二萜类化合物，其中8个为新结构（1-8）。化合物1-3为松香烷型，4-5为海松烷型，6-8为对映-贝壳杉烷型，通过HMBC相关信号和ROESY交叉峰确定其相对构型。

2. 绝对构型确定
   通过对比实验与计算的ECD谱图，如化合物1在210 nm处的负Cotton效应与计算结果一致，证实其3S,5R,10S构型。

3. 生物活性评价
   所有化合物在50 μM浓度下对AA诱导的血小板聚集抑制率<30%，对LPS诱导的NO生成抑制率<40%，低于阳性对照药阿司匹林（抑制率82%）和地塞米松（抑制率90%）。

结论与意义
该研究首次报道了Isodon leucophyllus中8个结构新颖的二萜类化合物，丰富了天然二萜的结构库。虽然未发现显著生物活性，但通过量子化学计算与波谱学技术的创新性结合，为复杂天然产物的构型确定提供了范例。研究成果对揭示唇形科植物的化学分类学特征及后续结构修饰具有指导价值，为开发基于二萜骨架的新型药物奠定了物质基础。