非洲猪瘟病毒B117L-213蛋白线性B细胞表位的单克隆抗体鉴定及其疫苗研发意义

非洲猪瘟（ASF）防控面临疫苗研发瓶颈，研究团队聚焦ASFV非结构蛋白B117L的免疫调控功能，通过制备B117L-213单克隆抗体（7F8D2A6/8B11C8F9/8H1D5H8），首次鉴定其线性B细胞表位，为ASFV疫苗设计提供关键靶点，填补了该蛋白功能研究的空白。

　　

非洲猪瘟（ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASFV）引发的烈性传染病，自1921年肯尼亚首次报道以来，已对全球养猪业造成毁灭性打击。2018年中国辽宁沈阳暴发疫情后，ASFV迅速蔓延全国，导致生猪存栏量断崖式下跌。这种病毒拥有复杂基因组和强大的免疫逃逸能力，其编码的200余种蛋白中，超过半数功能未知。尽管p72、p30等结构蛋白已被用于诊断试剂开发，但传统疫苗和亚单位疫苗均未能提供有效保护。

在这一背景下，河南省农业科学院的研究团队将目光投向ASFV的非结构蛋白B117L。该蛋白属于MGF360/505家族，可能参与病毒免疫逃逸和Ca²⁺稳态调控，但其具体功能仍是未解之谜。研究人员通过截取B117L蛋白的疏水片段（B117L-213），成功制备出三株特异性单克隆抗体（7F8D2A6、8B11C8F9、8H1D5H8，均为IgG2b/κ亚型），首次鉴定了该蛋白的线性B细胞表位。这项发表于《International Immunopharmacology》的研究，为ASFV疫苗设计提供了新思路。

关键技术包括：1）基于NCBI数据库获取B117L基因序列，截取213个碱基的疏水片段构建原核表达载体；2）通过镍柱亲和层析纯化重组蛋白；3）采用杂交瘤技术制备单抗并进行亚型鉴定；4）使用ELISA和Western blot验证抗体特异性。

研究结果
Genes, proteins, and cells
通过生物信息学分析选定B117L-213片段，其氨基酸序列为MGYTIQLDKDGDYCWDEDPTHHDPYMQANATSHVATSYATTSHAATPHAAAHHTFHEPFIKLNLTDKNIFN。

Construction of B117L-213 plasmid、protein expression and purification
双酶切电泳显示213bp目标条带（图1A），诱导表达后获得可溶性重组蛋白，纯度达90%以上。

Discussion
研究发现B117L可能通过调控内质网应激和Ca²⁺水平参与病毒免疫逃逸。与同家族蛋白F317L类似，B117L-213单抗的表位鉴定为揭示ASFV免疫抑制机制提供了新视角。

这项研究不仅填补了B117L蛋白功能研究的空白，其制备的单抗更可作为分子工具，用于探索ASFV免疫逃逸机制。三株单抗识别的线性表位信息，为多表位疫苗设计提供了精确靶点。在ASFV疫苗研发长期停滞的背景下，该成果标志着从"盲筛"到"精准靶向"的重要转变，对突破当前疫苗研发困境具有战略意义。研究团队特别指出，B117L与MGF360/505家族的关联性暗示其可能成为联合疫苗设计的核心组分，未来需进一步验证这些表位的免疫保护效力。