CD34+CD45+细胞通过外泌体递送miR-149-5p增强巨噬细胞胞葬作用缓解光气诱导的急性肺损伤

针对光气(COCl2)暴露导致的急性肺损伤(P-ALI)缺乏有效治疗手段的问题，复旦大学团队发现肺灌洗液中CD34+CD45+细胞可通过外泌体递送rno-miR-149-5p增强巨噬细胞胞葬作用(efferocytosis)，显著降低炎症因子水平并促进MHC-IIloCD163+抗炎表型巨噬细胞极化，为化学性肺损伤治疗提供新靶点。

　　

光气(COCl₂)作为重要的化工原料，其低水溶性和高脂溶性使其易蓄积在肺泡区域，导致急性肺损伤(P-ALI)甚至急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。目前临床治疗主要面临两大难题：一是无法逆转已形成的病理损伤，二是炎症级联反应难以有效控制。更棘手的是，当肺泡巨噬细胞对凋亡细胞的清除能力(即胞葬作用efferocytosis)受损时，凋亡细胞会继发坏死释放炎性介质，形成"炎症-损伤-再炎症"的恶性循环。

复旦大学团队在前期研究中通过单细胞测序发现，大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中存在具有干细胞特性的CD34⁺CD45⁺细胞亚群，能改善肺部炎症但机制不明。为此，研究人员在《International Immunopharmacology》发表的研究中，系统揭示了该细胞通过外泌体-miRNA调控巨噬细胞功能的分子机制。

研究采用三大关键技术：1) 光气暴露大鼠模型构建与CD34⁺CD45⁺细胞气管内给药；2) 流式细胞术检测巨噬细胞表型(CD45⁺CD3^?CD163⁺MHC-II^lo)及凋亡细胞清除率；3) 外泌体测序与miR-149-5p功能验证实验。

【CD34⁺CD45⁺ cells alleviated phosgene-induced lung injury in rat】
实验显示，CD34⁺CD45⁺细胞处理48小时后，肺组织凋亡细胞减少约60%，同时BALF中IL-6等炎性因子显著降低。流式分析发现该细胞诱导巨噬细胞向抗炎表型转化，胞葬效率提升2.3倍。

【CD34⁺CD45⁺ cell-derived exosomes enhanced macrophage efferocytosis】
体外实验证实，CD34⁺CD45⁺细胞来源的外泌体可独立促进NR8383巨噬细胞对凋亡Jurkat细胞的吞噬。透射电镜显示外泌体直径约100nm，Western blot检测到TSG101等外泌体标志蛋白。

【Exosomal rno-miR-149-5p mediated the enhancement of efferocytosis】
小RNA测序锁定rno-miR-149-5p为关键效应分子。转染实验表明，miR-149-5p模拟物使巨噬细胞胞葬效率提高至对照组的180%，而抑制剂则使外泌体效应降低57%。

该研究首次阐明CD34⁺CD45⁺细胞通过外泌体-miR-149-5p轴调控巨噬细胞功能的双通路机制：一方面促进抗炎表型转化，另一方面增强胞葬作用阻断"二次坏死"的恶性循环。Xuanrong Bao等作者指出，这一发现不仅为化学性肺损伤提供了新型细胞治疗策略，其鉴定的miR-149-5p更可作为无细胞治疗的分子靶标。研究还提示，肺泡微环境中干细胞-免疫细胞的互作网络可能是急性肺损伤转归的关键调控点，为ARDS等重症的免疫调节治疗开辟了新思路。