血浆hsa-miR-24-3p/hsa-miR-181d-3p与IFN-γ水平及IFNG rs2069727 T/C变异在多发性硬化风险及醋酸格拉替雷治疗中的调控机制与诊断价值

本研究针对多发性硬化(MS)诊断标志物匮乏的临床难题，通过分析330例复发缓解型MS(RRMS)患者和健康对照，首次揭示了血浆hsa-miR-24-3p/hsa-miR-181d-3p表达上调与IFN-γ水平下降的负相关性，证实三者联合诊断RRMS的AUC达0.806。该成果为MS早期诊断提供了新型血液标志物组合，并为醋酸格拉替雷(GA)治疗机制研究开辟新视角。

　　

多发性硬化(MS)作为一种复杂的自身免疫性神经退行性疾病，其发病机制犹如迷宫般令人困惑。尽管已知遗传易感性、环境因素和表观遗传调控共同参与其中，但超过55%的遗传性仍无法解释。更棘手的是，临床上广泛使用的扩展残疾状态量表(EDSS)主要反映肢体功能障碍，缺乏能准确预测疾病进展的分子标志物。在这个背景下，干扰素γ(IFN-γ)的角色显得尤为矛盾——既有研究显示它可能加剧神经炎症，又有证据表明其具有神经保护作用。这种"双面性"使得科学家们将目光投向其上游调控机制，特别是能精细调控基因表达的微小RNA(miRNA)和单核苷酸多态性(SNP)。

来自土耳其安卡拉比尔肯特市医院的研究团队开展了一项开创性研究，他们首次将IFNG基因rs2069727 T/C变异、血浆hsa-miR-24-3p/hsa-miR-181d-3p表达谱和IFN-γ蛋白水平这三重维度整合分析。研究采用病例对照设计，包含330例RRMS患者和匹配的健康对照进行基因分型，并从中选取25例未治疗患者、25例醋酸格拉替雷(GA)治疗患者及25例对照组成miRNA研究亚组。通过TaqMan SNP分型、miRCURY LNA RT-qPCR和高灵敏度ELISA等技术，揭示了这些分子标志物在MS诊断和治疗监测中的潜在价值。

IFNG rs2069727 T/C变异分析
基因分型显示该SNP在土耳其人群中的多态性分布与欧美人群存在差异，其CC基因型频率在RRMS组(21.21%)与健康组(24.24%)无统计学差异。值得注意的是，该变异与血浆IFN-γ水平无显著关联，这提示种族差异可能影响SNP的功能效应。

miRNA表达特征
研究发现hsa-miR-24-3p在GA治疗组和未治疗组的相对表达量分别较健康组高3.9倍和3.25倍，其诊断RRMS的曲线下面积(AUC)达0.822。hsa-miR-181d-3p也呈现类似升高趋势，两者表达量呈显著正相关。尤为关键的是，当hsa-miR-181d-3p>2.90时，患者血浆IFN-γ水平显著降低，这为miRNA负调控IFN-γ的假说提供了临床证据。

IFN-γ蛋白动态
年龄校正后的血浆IFN-γ水平在患者组显著降低(GA组1.28 pg/mL vs 健康组1.34 pg/mL)。令人意外的是，GA治疗并未如预期升高IFN-γ水平，反而与更长的病程(r=-0.623)和更高残疾评分(EDSS)相关，这提示GA可能通过非IFN-γ依赖途径发挥免疫调节作用。

诊断模型构建
将三种标志物整合建立的联合诊断模型展现出优异性能：区分GA治疗组与健康组的AUC提升至0.806，灵敏度达86%。logistic回归证实hsa-miR-181d-3p是预测MS状态的独立因素(OR=1.52)。

这项发表于《Molecular Neurobiology》的研究具有多重突破意义：首次证实hsa-miR-181d-3p可作为MS诊断标志物；揭示了GA治疗下IFN-γ-miRNA调控网络的特殊性；为开发新型血液检测方法奠定基础。研究也存在局限性，如横断面设计难以观察动态变化，但提出的"p65/miR-181d-3p/IFN-γ"调控轴为后续机制研究指明方向。这些发现不仅深化了对MS发病机制的理解，更为个体化治疗监测提供了潜在靶点，标志着MS精准医疗向前迈出重要一步。