膀胱癌是全球第九大常见恶性肿瘤，其中约25%的病例会发展为致命的肌层浸润性膀胱癌(MIBC)。尽管早期诊断和治疗手段不断进步，但高复发率仍是临床面临的重大挑战。近年来，非编码RNA(ncRNA)作为癌症进展的关键调控因子备受关注，但其在膀胱癌中的具体作用机制尚不明确。特别是从非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)向MIBC转变过程中，哪些ncRNA参与调控这一关键进程仍待阐明。

来自意大利的研究团队在《Cell Death Discovery》发表重要研究成果，通过比较NMIBC和MIBC细胞系，发现长链非编码RNA LEADR（由MIR205HG基因编码）在NMIBC中特异性高表达。该研究揭示了p63-LEADR-干扰素信号轴在维持膀胱上皮细胞稳态中的关键作用，为理解膀胱癌进展机制提供了新视角。

研究采用多种关键技术方法：通过TCGA数据库分析膀胱癌临床样本的转录组数据；利用RNA测序(RNA-seq)比较NMIBC和MIBC细胞系的ncRNA表达谱；采用染色质免疫沉淀(ChIP)和荧光原位杂交(FISH)技术分析表观遗传调控机制；通过siRNA敲降结合功能实验验证LEADR的生物学效应。

研究结果部分，"LEADR在非浸润性膀胱癌中高表达"显示，通过比较RT4、RT112（NMIBC）与T24、TCCSUP（MIBC）细胞系，发现MIR205HG/LEADR是NMIBC中最显著下调的ncRNA之一。TCGA数据分析证实，MIR205HG表达与肿瘤分级、分期和淋巴血管浸润呈负相关。

"p63调控膀胱癌中LEADR表达"部分揭示，p63是调控MIR205HG表达的关键转录因子。实验证实ΔNp63亚型特异性存在于NMIBC细胞核内，通过siRNA敲降p63可显著降低LEADR表达。ChIP-seq分析发现p63结合在MIR205HG基因座的三个增强子区域。

"LEADR在晚期膀胱癌中表观遗传沉默"部分表明，在MIBC细胞中，MIR205HG位点的H3K27ac修饰和RNA聚合酶II结合显著减少，导致LEADR表达沉默。p63敲除实验证实其通过维持增强子2和3的组蛋白乙酰化来调控LEADR表达。

"LEADR抑制干扰素刺激基因亚群"部分发现，LEADR敲降导致235个基因上调，其中干扰素信号通路相关基因（如IRF7、IRF9）显著富集。蛋白质水平验证显示LEADR缺失导致IRF7和IRF9蛋白水平升高，这与MIBC细胞中观察到的现象一致。免疫浸润分析显示LEADR高表达肿瘤富含CD4⁺ T细胞。

研究结论指出，LEADR作为p63调控的下游效应分子，通过抑制干扰素刺激基因(ISGs)的过度激活，维持膀胱上皮细胞的稳态。在MIBC中，p63/LEADR轴的缺失导致干扰素信号通路持续激活，可能促进肿瘤细胞对免疫治疗的抵抗。该研究不仅阐明了ncRNA在膀胱癌进展中的新机制，还为开发基于LEADR的分子分型和靶向治疗策略提供了理论依据。

讨论部分强调，这项研究首次系统揭示了LEADR在膀胱癌中的抑癌作用，其通过调控干扰素信号通路影响肿瘤免疫微环境。特别值得注意的是，LEADR高表达与CD4⁺ T细胞浸润正相关，提示其可能增强抗肿瘤免疫应答。这些发现为理解膀胱癌异质性和开发联合免疫治疗策略提供了重要线索。