CD200R1-CD47双靶点协同阻断通过Csk-SHP差异通路增强巨噬细胞吞噬功能抑制肿瘤生长

本研究针对CD47广泛表达导致的免疫治疗毒性问题，发现CD200R1-CD200作为新型吞噬检查点通过Csk激酶（而非SIRPα-CD47的SHP-1/2磷酸酶通路）抑制巨噬细胞功能。通过质谱互作筛选、基因编辑和临床前模型，证实双靶点阻断可协同增强CD200+肿瘤（如B细胞恶性肿瘤/黑色素瘤）的吞噬效应，为精准免疫治疗提供新策略。

　　

在肿瘤免疫治疗领域，巨噬细胞表面的"别吃我"信号一直备受关注。尽管靶向SIRPα-CD47通路的疗法在血液肿瘤中展现出潜力，但CD47在红细胞等正常组织的广泛表达导致严重贫血和血小板减少等副作用。更棘手的是，约50%的黑色素瘤和B细胞恶性肿瘤对现有疗法响应有限。这些临床困境促使科学家寻找更精准的免疫检查点。

加拿大蒙特利尔临床研究所的Jiaxin Li、Zhaoyu Wang等研究者发现，CD200R1-CD200这对相互作用分子可能是破局关键。与"广谱"的CD47不同，CD200仅在特定肿瘤（如慢性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤）和部分正常细胞（如活化B细胞）中表达。通过蛋白质质谱分析，团队首次揭示CD200R1与吞噬关键受体CD11b存在物理互作。当用抗体阻断CD200R1-CD200或基因敲除该通路时，巨噬细胞对CD200⁺肿瘤细胞的吞噬活性显著增强，且效应在15分钟内即可通过显微镜观察到肌动蛋白极化。这种快速响应暗示CD200R1直接调控吞噬过程，而非通过间接炎症调节。

研究采用多组学技术揭示分子机制：通过磷酸化肽段pull-down联合质谱，发现CD200R1胞内段Y286/Y297位点招募Dok-1/Dok-2适配体，进而募集Csk激酶抑制Src家族激酶活性。这与SIRPα依赖SHP-1/SHP-2磷酸酶的经典通路形成鲜明对比。这种机制差异为联合治疗奠定基础——在WEHI-231淋巴瘤模型中，双靶点阻断使肿瘤生长抑制效果产生协同效应，且避免了对CD8⁺ T细胞（低表达CD200）的误伤。

临床转化方面具有重要意义：单细胞测序显示CD200R1主要在IL-4诱导的C1QC⁺肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）中高表达，这类细胞具有强吞噬潜能但被免疫抑制性受体束缚。使用临床阶段抗体samalizumab（抗CD200）联合利妥昔单抗，在NSG小鼠模型中人源淋巴瘤体积显著缩小。由于CD200在红细胞不表达，该策略有望规避CD47阻断剂的血液毒性。

关键技术包括：1）CD11b免疫沉淀质谱筛选互作蛋白；2）CRISPR构建Cd200r1^-/-巨噬细胞和Cd200^-/-肿瘤细胞；3）pHrodo荧光标记的实时吞噬分析；4）人源化小鼠模型（采用健康供体来源的PBMC分化巨噬细胞）；5）磷酸化肽段质谱分析信号通路。

主要研究结论包括：

1. CD200R1-CD200抑制吞噬的遗传证据：Cd200r1^-/-巨噬细胞对CD200⁺肿瘤细胞的吞噬活性与抗体阻断效果相当，证实该通路的直接调控作用。
2. 人类细胞分布特征：CD200在60%黑色素瘤和B细胞肿瘤特异性表达，而CD200R1经IL-4诱导后在C1QC⁺ TAMs富集，与SIRPα的泛表达形成对比。
3. Csk依赖的新机制：不同于SIRPα的SHP-1/2磷酸酶途径，CD200R1通过Y297-Dok-Csk轴抑制Lyn^Y507磷酸化，阻断吞噬信号。
4. 临床前治疗优势：双靶点阻断使淋巴瘤模型生存期显著延长，且samalizumab不增加CD8⁺ T细胞清除，安全性更优。

这项发表于《Nature Communications》的研究革新了人们对巨噬细胞检查点的认知，首次阐明CD200R1-CD200通过Csk激酶调控吞噬的分子路径。其临床价值在于：①为CD200⁺肿瘤提供精准治疗靶点；②联合SIRPα-CD47阻断可降低各药物剂量从而减少毒性；③揭示TAMs中C1QC⁺亚群的治疗潜力。未来需在更多实体瘤模型中验证该策略，并探索与其他免疫疗法的协同效应。