溶瘤痘苗病毒载体Western Reserve与天坛株表达外源基因Aphrocallistes vastus凝集素的抗肿瘤效应比较研究

为解决不同痘苗病毒载体（VV）表达外源基因Aphrocallistes vastus凝集素（AVL）的抗肿瘤效果差异问题，研究人员对比了Western Reserve株（WR）与天坛株（TT）构建的溶瘤痘苗病毒（oncoVVWR-AVL与oncoVVTT-AVL）。研究发现，oncoVVWR-AVL通过更高活性氧（ROS）水平、更强病毒复制及免疫应答激活，展现出更显著的抗肿瘤效果，为溶瘤病毒载体选择提供了科学依据。

　　

在肿瘤治疗领域，溶瘤病毒（Oncolytic Virus, OV）因其选择性复制能力和多重抗肿瘤机制成为研究热点。痘苗病毒（Vaccinia Virus, VV）作为经典载体，其不同毒株特性可能影响外源基因表达效果。Aphrocallistes vastus凝集素（AVL）是一种Ca²⁺依赖性C型凝集素受体，前期研究表明其在Western Reserve株（WR）载体中可显著增强抗肿瘤作用，但天坛株（TT）作为中国天花疫苗主力株的潜力尚未明确。这一空白促使研究人员系统比较两种载体的差异。

浙江某研究团队在《Biochemical and Biophysical Research Communications》发表的研究中，采用基因工程构建了TK基因敲除的oncoVV^WR和oncoVV^TT载体，并插入AVL基因。通过MTT法检测细胞毒性，流式细胞术分析凋亡，qPCR评估病毒复制效率，以及ELISA检测细胞因子分泌，系统评估了两种载体在卵巢癌（A2780）、胃癌（MKN-45）和胰腺癌（PANC-1）细胞中的效果。

比较oncoVV^WR-AVL与oncoVV^TT-AVL在A2780、MKN-45和PANC-1细胞系的细胞毒效应
MTT实验显示，在5 MOI剂量下，oncoVV^WR-AVL对A2780和MKN-45细胞的杀伤率较oncoVV^TT-AVL提高20%-35%，但在PANC-1细胞中两者无显著差异，提示肿瘤类型依赖性。

病毒复制能力差异
qPCR检测发现，oncoVV^WR-AVL在48小时的病毒拷贝数较TT载体高3.1倍，这与WR株更强的胞内复制特性相关。

ROS水平与凋亡机制
流式检测表明，oncoVV^WR-AVL诱导的ROS水平较TT载体高2.7倍，通过激活AMPK通路促进凋亡，而TT载体依赖ERK信号的程度更高。

免疫调节作用
ELISA数据显示，oncoVV^WR-AVL显著提升TNF-α和IL-6分泌量，且不触发干扰素抗病毒反应，而TT载体对AP-1通路的激活较弱。

研究结论指出，WR载体凭借更强的ROS生成、病毒复制及免疫激活能力，在多数肿瘤模型中优于TT载体。这一发现为溶瘤病毒载体选择提供了直接证据，尤其对实体瘤治疗策略优化具有指导意义。讨论部分强调，TT株虽在安全性上有历史验证，但其抗肿瘤效应需通过外源基因改造进一步提升。该研究为基于中国疫苗株的溶瘤病毒开发奠定了理论基础。