海洋真菌Eutypella scoparia GZU-4-19Y中新型eremophilane型倍半萜的发现及其抗肿瘤与抗炎活性研究

研究人员从海洋真菌Eutypella scoparia GZU-4-19Y中分离出7种新型eremophilane型倍半萜（1-7）及已知化合物cryptosphaerolide（8），通过NMR和电子圆二色谱解析结构，发现其独特的11碳烷基链特征。体外实验显示，化合物4、5、7、8对HT29和HepG2癌细胞具细胞毒性，化合物5和8能显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO生成（IC50分别为26.9和13.7 μM），并下调iNOS和COX-2表达，为抗炎药物研发提供新线索。

　　

在天然药物化学领域，海洋真菌因其独特的生存环境常产生结构新颖的活性代谢产物，成为抗肿瘤和抗炎药物研发的重要资源。然而，具有明确药理活性的eremophilane型倍半萜在自然界中较为罕见，尤其是带有11碳烷基链的特殊结构尚未被充分探索。此外，现有抗炎药物如吲哚美辛（indomethacin）存在副作用问题，亟需发现更安全高效的替代化合物。

针对这一科学问题，贵州医科大学的研究团队从海洋来源的真菌Eutypella scoparia GZU-4-19Y中分离鉴定出7个新化合物eutymeroterpenoids A-G（1-7）和已知化合物cryptosphaerolide（8）。通过核磁共振（NMR）和电子圆二色谱（ECD）计算确定了它们的绝对构型，发现这些化合物均含有罕见的11碳烷基链结构特征。研究团队进一步评估了其抗肿瘤和抗炎活性，发现化合物4、5、7、8对结肠癌HT29和肝癌HepG2细胞系表现出中等细胞毒性；化合物5和8能显著抑制脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞一氧化氮（NO）产生，IC₅₀值分别为26.9 μM和13.7 μM，效果优于阳性对照吲哚美辛（24.2 μM）。Western blot分析揭示，这两种化合物通过下调诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和环氧合酶-2（COX-2）的表达发挥抗炎作用。该成果发表于《Fitoterapia》，为开发新型抗炎和抗肿瘤药物提供了先导化合物。

关键技术方法
研究采用硅胶柱层析和高效液相色谱（HPLC）从真菌发酵物中分离纯化化合物；通过一维/二维核磁共振（¹H NMR、¹³C NMR、HSQC、HMBC）和质谱（MS）解析结构；利用电子圆二色谱（ECD）计算确定绝对构型；采用CCK-8法评估细胞毒性，Griess法检测NO水平，Western blot分析iNOS和COX-2蛋白表达。

研究结果

1. 化合物分离与结构鉴定
   从真菌发酵物中分离出8个eremophilane型倍半萜，其中7个为新化合物。ECD计算证实化合物1-7的绝对构型为4R,5R,7R,10S。

2. 细胞毒性评价
   化合物4、5、7、8对HT29和HepG2细胞的IC₅₀值范围为18.6-42.3 μM，显示中等抗肿瘤活性。

3. 抗炎机制研究
   化合物5和8通过抑制iNOS和COX-2表达，阻断NF-κB信号通路，减少炎症介质NO的释放。

结论与意义
该研究首次报道了海洋真菌来源的含11碳烷基链eremophilane型倍半萜，拓展了天然产物的结构多样性。化合物5和8通过双重抑制iNOS/COX-2表现出优于传统抗炎药的潜力，其独特结构为设计低毒性抗炎药物提供了新模板。研究成果不仅揭示了Eutypella scoparia的药用价值，也为海洋微生物资源的开发提供了科学依据。