内镜样本个性化药物分层评估胃癌组织对化疗及免疫检查点抑制剂的体外敏感性研究

这篇研究创新性地利用内镜来源的胃/食管胃结合部癌患者组织切片培养模型（ePDTCs），通过模拟肿瘤微环境（TME）评估个体化药物敏感性。研究证实，该模型能稳定检测5-FU、FLOT方案（含奥沙利铂/多西他赛）、SN38（伊立替康活性代谢物）及PD-1抑制剂纳武利尤单抗的剂量依赖性反应，并发现添加2%自体血清可增强培养效果。为临床前药物筛选提供了保留肿瘤异质性的新工具，对推动精准医疗具有重要意义。

　　

内镜样本个性化药物分层研究突破
胃和食管胃结合部癌是全球癌症相关死亡的第三和第六大原因，每年导致约130万例死亡。由于缺乏早期症状，这些癌症通常在晚期才被诊断，治疗选择有限且预后较差。传统化疗方案如FLOT（5-FU+亚叶酸+奥沙利铂+多西他赛）虽能改善生存，但中位总生存期仅50个月，亟需更精准的治疗策略。

肿瘤异质性与培养挑战
研究团队开发了内镜患者来源组织切片培养（ePDTC）模型，直接从患者活检样本中获取肿瘤组织，切成350微米薄片进行体外培养。通过分析14例胃癌和食管胃结合部癌样本，发现至少需要4个内镜样本才能充分代表肿瘤异质性。组织切片在培养72小时内保持稳定，添加2%自体血清显著改善了形态学保存和上皮屏障形成。

药物敏感性验证
研究测试了多种治疗方案：

• SN38（伊立替康活性代谢物）：在1 μM和10 μM浓度下均显示剂量依赖性反应，所有样本均出现肿瘤细胞比例下降和凋亡增加（p≤0.001）。
• 5-FU：个体差异显著，部分样本对1 μM浓度敏感，而其他样本无反应。
• FLOT方案：既往接受过FLOT治疗的患者样本普遍表现出耐药性，而初治样本则显示敏感性。
• PD-1抑制剂：纳武利尤单抗（3 μg/ml）在部分样本中诱导明显的组织重构和肿瘤细胞减少。

技术优化与临床意义
通过免疫荧光染色（细胞角蛋白AE1-3/cPARP/Ki67）和自动图像分析，研究建立了标准化的反应评估体系。值得注意的是，培养系统中肿瘤微环境的保留使得免疫治疗反应评估成为可能，这在传统二维培养模型中难以实现。

未来展望
尽管ePDTCs在模拟临床反应方面展现出潜力，但需要更大队列研究验证其预测价值。该模型为探索联合治疗方案、耐药机制及生物标志物提供了独特平台，尤其适用于评估免疫治疗相关不良反应和肿瘤-免疫相互作用。

方法学细节
样本处理采用组织切片机（McIlwain TC 752）制备350微米切片，培养于RPMI-1640培养基（含10%胎牛血清或8%胎牛血清+2%自体血清）。药物暴露时间为48-72小时，通过H&E染色和多重免疫荧光进行终点分析。统计采用GraphPad Prism 9进行ANOVA或Mann-Whitney检验。

这项技术突破为胃癌精准医疗提供了可操作性强、临床转化路径短的解决方案，有望缩短药物筛选周期并降低无效治疗带来的负担。