miR-17-5p通过靶向抑制SIK1促进肺腺癌恶性进展的分子机制及临床意义

这篇研究揭示了miR-17-5p在肺腺癌（LUAD）中的致癌作用，通过荧光定量PCR（qPCR）、CCK-8、流式细胞术和Transwell实验证实其高表达促进细胞增殖、迁移侵袭并抑制凋亡。结合生物信息学预测和双荧光素酶报告基因检测，首次验证SIK1是miR-17-5p的直接靶点，Western blot显示miR-17-5p负调控SIK1的mRNA和蛋白表达。TCGA数据分析进一步支持miR-17-5p/SIK1轴在肺癌组织中的临床相关性，为肺癌诊断和治疗提供新靶点。

　　

1 引言
肺癌作为全球高致死率恶性肿瘤，非小细胞肺癌（NSCLC）占比达85%，其中肺腺癌（LUAD）是最常见亚型。微小RNA（miRNA）通过结合靶基因3'非翻译区（3'UTR）调控转录后表达，在肿瘤中发挥双重作用。miR-17-5p作为miR-17~92基因簇成员，在多种癌症中呈现促癌或抑癌功能，但其在LUAD中的机制尚未明确。本研究聚焦miR-17-5p/SIK1轴，探索其在LUAD进展中的分子机制。

2 方法
实验选用4种NSCLC细胞系（A549、HCC827、PC-9、H1299）和正常肺上皮细胞BEAS-2B，通过qPCR检测miR-17-5p表达差异。采用miR-17-5p模拟物（mimics）和抑制剂（inhibitor）转染高表达细胞系A549，CCK-8检测增殖，流式细胞术分析凋亡，Transwell评估迁移侵袭能力。基于Starbase和TargetScan预测靶基因，通过双荧光素酶报告系统验证miR-17-5p与SIK1 3'UTR的结合，Western blot检测SIK1蛋白表达。TCGA数据库分析临床样本中miR-17-5p与SIK1的表达相关性。

3 结果

• 促增殖与抗凋亡效应：qPCR显示miR-17-5p在LUAD细胞中表达显著高于正常细胞（P<0.01），CCK-8证实其过表达使A549增殖率提升2.3倍（P<0.001），流式显示凋亡率下降40%（P<0.05）。
• 迁移侵袭增强：Transwell实验显示miR-17-5p mimics组穿透Matrigel的细胞数增加3.1倍（P<0.01）。
• 靶向调控SIK1：双荧光素酶实验证实miR-17-5p直接结合SIK1 3'UTR野生型（Wt）而非突变型（Mut），导致荧光活性降低60%（P<0.05）。Western blot显示SIK1蛋白在mimics组下调70%（P<0.01）。
• 临床数据验证：TCGA分析揭示肺癌组织中miR-17-5p表达上调2.5倍（P<0.001），SIK1表达下调1.8倍（P<0.001）。

4 讨论
SIK1作为AMPK家族激酶，在多种癌症中发挥抑癌作用。本研究发现miR-17-5p通过抑制SIK1表达激活下游促癌通路，与既往报道的胰腺癌中miR-17-5p/RBL2/E2F4机制形成对比，凸显其肿瘤类型特异性。临床样本分析提示miR-17-5p可作为LUAD诊断标志物，但其调控上皮间质转化（EMT）的机制仍需深入探索。

5 结论
研究首次阐明miR-17-5p/SIK1轴在LUAD中的调控网络，为开发基于miRNA的靶向治疗策略提供理论依据。未来需扩大临床样本验证其诊断价值，并探索联合靶向治疗的可行性。