TRIM19通过调控TBX2/NRF2轴增强子宫内膜癌化疗敏感性的机制研究

本研究针对子宫内膜癌化疗耐药这一临床难题，揭示了TRIM19通过泛素化降解TBX2蛋白、抑制NRF2信号通路逆转顺铂耐药的新机制。淄博市中心医院团队通过构建耐药细胞模型（Ishikawa/DDP），结合免疫共沉淀（Co-IP）和环己酰亚胺（CHX）追踪实验，首次证实TRIM19与TBX2的直接相互作用可促进其降解，为克服子宫内膜癌化疗耐药提供了新靶点。该成果发表于《Discover Oncology》，对临床联合靶向治疗具有重要指导意义。

　　

子宫内膜癌作为妇科常见恶性肿瘤，近年来发病率和死亡率持续攀升，其中晚期患者主要依赖含铂类药物的化疗方案。然而临床实践中，顺铂（Cisplatin）耐药现象导致近半数患者治疗失败，成为制约疗效的关键瓶颈。既往研究发现T-Box转录因子2（TBX2）通过调控核因子E2相关因子2（NRF2）信号促进耐药，但其上游调控机制尚不明确。淄博市中心医院团队注意到三结构域蛋白19（TRIM19）在卵巢癌中具有化疗增敏作用，结合生物信息学预测其与TBX2的潜在相互作用，由此展开这项揭示TRIM19-TBX2-NRF2调控轴的研究。

研究采用11例顺铂敏感（Cis-S）和14例顺铂耐药（Cis-R）子宫内膜癌临床样本，通过逐步递增药物浓度法构建Ishikawa/DDP耐药细胞系。主要技术包括：①实时定量PCR（RT-qPCR）和Western blot检测基因表达；②细胞计数试剂盒-8（CCK-8）评估细胞活力；③Myc-TRIM19质粒转染实现基因过表达；④免疫共沉淀（Co-IP）验证蛋白互作；⑤环己酰亚胺（CHX）追踪实验分析蛋白稳定性。

3.1 TRIM19在耐药组织和细胞中低表达
临床样本分析显示，Cis-R组TRIM19 mRNA水平显著低于Cis-S组（图1A）。建立的Ishikawa/DDP细胞对顺铂半数抑制浓度（IC₅₀
）>40μM，远高于亲代细胞的30μM（图1B），且TRIM19在mRNA和蛋白水平均显著下调（图1C-E），提示其与耐药表型相关。

3.2 TRIM19过表达增强化疗敏感性
过表达TRIM19使Ishikawa和Ishikawa/DDP细胞的IC₅₀
分别降至18μM和38μM（图2B-C），证实其能逆转耐药性。Western blot显示耐药细胞中TBX2蛋白水平异常升高，而TRIM19过表达可显著抑制TBX2表达（图3C-D），暗示二者存在调控关系。

3.3 TRIM19负调控TBX2/NRF2信号轴
机制研究发现，TRIM19过表达不仅降低NRF2蛋白水平（图4A-B），还使其下游靶基因血红素加氧酶1（HMOX1）和NAD(P)H醌氧化还原酶1（NQO1）的mRNA表达量下降50%以上（图4D-E）。Co-IP实验首次证实TRIM19与TBX2直接结合（图5A-B），CHX追踪实验显示TRIM19可加速TBX2蛋白降解（半衰期从>16小时缩短至8小时）（图5C-D），阐明其通过E3泛素连接酶活性促进TBX2泛素化降解的分子机制。

该研究创新性揭示TRIM19-TBX2-NRF2轴在子宫内膜癌顺铂耐药中的核心作用：①临床层面，TRIM19表达水平可作为预测化疗响应的生物标志物；②治疗层面，靶向激活TRIM19或抑制TBX2为逆转耐药提供新策略；③机制层面，首次阐明TRIM19通过K48连接的多聚泛素化修饰诱导TBX2降解的通路。值得注意的是，作者指出未来需进一步验证TRIM19敲除是否诱发敏感细胞产生耐药性，以及明确具体的泛素化连接类型。这些发现为开发TRIM19激动剂或TBX2抑制剂的联合治疗方案奠定理论基础，对改善晚期子宫内膜癌预后具有重要临床价值。