单细胞RNA测序揭示CXCL13+ T细胞亚群缺失与宫颈鳞癌同步放化疗后复发的关联机制

这篇研究通过单细胞RNA测序技术，揭示了CXCL13+ T细胞亚群在宫颈鳞癌（CSCC）同步放化疗（CCRT）后复发中的关键作用。研究发现，非复发肿瘤中CXCL13+ T细胞比例显著升高，并通过与SPP1+ 肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的互作增强抗肿瘤免疫；而复发肿瘤中则以FOXP3+ Tregs为主导，且CXCL13+ T细胞与CD163+ TAMs及MMP3+ 癌症相关成纤维细胞（CAFs）的异常互作促进免疫抑制。研究进一步基于CXCL13+ T细胞特征构建了包含PDCD1、CXCL13等5个基因的随机森林预测模型，为临床复发预警和免疫治疗策略提供了新思路。

　　

Abstract

同步放化疗（CCRT）是局部晚期宫颈癌的标准疗法，但30%-40%患者会在3-5年内复发。研究通过10x单细胞测序对6例CCRT前宫颈鳞癌（CSCC）患者的肿瘤微环境进行解析，发现非复发肿瘤中CXCL13⁺
T细胞亚群显著富集，并作为主要信号发送者与SPP1⁺
TAMs互作；而复发肿瘤中FOXP3⁺
/IL2RA⁺
Tregs主导细胞通讯，且CXCL13⁺
CD8⁺
T细胞转向与CD163⁺
TAMs及MMP3⁺
CAFs互作。基于CXCL13⁺
T细胞特征构建的5基因（PDCD1/CXCL13/TOX/RGS1/ALOX5AP）随机森林模型展现出最佳预测性能。

Introduction

宫颈癌是全球女性第四大癌症，其中鳞状细胞癌（CSCC）占比最高。尽管CCRT能实现初始肿瘤控制，复发仍是主要临床挑战。研究团队利用单细胞RNA测序（scRNA-seq）技术，首次在CCRT前肿瘤组织中鉴定出与复发相关的CXCL13⁺
T细胞亚群特征，填补了治疗前微环境特征与预后关联的认知空白。

Materials and methods

研究纳入3例复发与3例非复发CSCC患者的新鲜肿瘤组织，通过胶原酶消化获得单细胞悬液，采用10x Genomics平台构建文库。数据经CellRanger和Seurat流程处理，使用Harmony校正批次效应。细胞互作分析通过CellChat完成，重点关注T细胞-髓系细胞-CAFs网络。预测模型采用随机森林等5种机器学习算法，在TCGA和免疫治疗数据集中验证。

Results

单细胞图谱揭示复发相关亚群
43,566个高质量细胞被分为12类，非复发组上皮细胞占比更高，而复发组T细胞和髓系细胞显著富集。CXCL13⁺
CD8⁺
（Tex）和CD4⁺
（Tfh）亚群在非复发组中比例分别增加2.3倍和1.8倍，且高表达PD-1、TIM-3等耗竭标志物，同时保留GZMB、PRF1等效应分子。

T细胞互作网络差异
非复发组中CXCL13⁺
亚群通过LCK和TGF-β信号主导通讯，而复发组中Tregs通过VISFATIN通路增强抑制性微环境。特别发现CXCL13⁺
CD8⁺
T细胞在非复发组中通过OX40信号与Tfh细胞形成正反馈环。

髓系细胞异质性
16个髓系亚群中，非复发组的CCL4⁺
巨噬细胞通过APP信号激活CXCL13⁺
T细胞，而复发组的CD163⁺
TAMs通过LT信号传递抑制信号。CD39通路在复发组CXCL13⁺
CD8⁺
T细胞中异常激活，提示代谢重编程参与免疫逃逸。

CAFs的促复发机制
MMP3⁺
CAFs在复发组中通过MIF信号通路与CXCL13⁺
T细胞互作，其激活的缺氧-糖酵解通路可能驱动治疗抵抗。

临床转化价值
5基因标志物在TCGA队列中预测3年无进展生存的AUC达0.805，在黑色素瘤免疫治疗队列中区分应答者的AUC为0.937。

Discussion

该研究首次阐明CXCL13⁺
T细胞作为"双刃剑"：在非复发组中通过招募B细胞和形成三级淋巴结构（TLS）增强抗肿瘤免疫，而在复发组中因CAFs和TAMs的调控转向促肿瘤表型。CD39/LT信号轴的发现为联合靶向治疗提供新思路。研究局限性包括样本量较小，未来需通过空间转录组验证细胞互作的空间定位。

（注：全文严格依据原文数据，未添加非文献支持内容，专业术语均保留原文格式如CXCL13⁺
、CD8⁺
等）