微球流式细胞术定量检测总免疫球蛋白E(tIgE)方法的建立及其在过敏性疾病诊断中的应用价值

天津医科大学第二医院团队针对过敏性疾病诊断中tIgE检测的局限性，成功建立了一种基于微球流式细胞术的定量检测方法。该方法具有高重复性（CV<8.41%）、宽检测范围（2-6000 IU/mL）和良好线性（r=0.9932），与ImmunoCAP和免疫比浊法高度相关（r>0.934），为临床实验室提供了一种高效、低成本的多重sIgE检测解决方案。

　　

研究背景与意义
过敏性疾病正成为全球性健康挑战，而免疫球蛋白E(IgE)作为关键效应分子，其检测技术直接影响诊断准确性。传统方法如ImmunoCAP虽被视为"金标准"，但存在单次检测靶点有限、成本高昂等问题。更棘手的是，临床发现部分患者虽呈现皮肤点刺试验(SPT)和特异性IgE(sIgE)阳性，却能耐受相应过敏原，提示现有检测体系存在局限性。与此同时，IgE的临床价值已超越过敏领域，在寄生虫感染、慢性荨麻疹甚至心血管疾病中均有重要作用，亟需发展更高效、经济的检测技术。

天津医科大学第二医院的研究团队瞄准这一技术瓶颈，创新性地将微球流式细胞术应用于总IgE(tIgE)定量检测体系的开发。这项发表在《Clinica Chimica Acta》的研究，不仅建立了标准化的检测流程，更通过方法学验证证实了其临床适用性，为后续开发多重过敏原sIgE检测奠定了关键技术基础。

关键技术方法
研究团队采用多阶段优化策略：首先筛选具有APC/APC-Cy7荧光信号的聚苯乙烯微球作为载体；通过棋盘滴定法优选抗体配对（捕获抗体与生物素化检测抗体）；建立WHO 11/234标准品溯源的标准曲线；最后对102例过敏患者血清进行方法学验证，以ImmunoCAP和免疫比浊法作为参照。

研究结果

微球与抗体优化
实验证实所选微球在流式检测中呈现均一粒径和稳定信号。捕获抗体以1:2000、检测抗体以1:1000为最佳工作浓度，此时信噪比达峰值。

方法学性能
• 精密度：批内CV为7.62%/6.98%，批间CV为7.50%/8.41%
• 检测范围：2-6000 IU/mL，线性范围2-3363 IU/L（r=0.9932）
• 相关性：与ImmunoCAP(r=0.9345)、免疫比浊法(r=0.9348)高度一致

临床应用验证
在102例过敏患者样本中，该方法成功区分了sIgE≥0.35 kU_A
/L的阳性样本，阴性对照无交叉反应，证实其临床特异性。

结论与展望
该研究创新性地构建了具有国际标准溯源性的微球流式tIgE检测体系，其优势体现在：

1. 突破单重检测限制，为后续开发多重sIgE检测奠定技术基础；
2. 检测性能媲美ImmunoCAP但成本显著降低；
3. 宽动态范围可覆盖从儿童到重症患者的临床需求。

特别值得注意的是，研究者强调tIgE/sIgE比值对预测免疫耐受的潜在价值，这为过敏原特异性免疫治疗(AIT)的疗效监测提供了新思路。随着流式细胞仪在基层医院的普及，该方法有望推动过敏诊断技术的标准化和可及性，对实现精准过敏医学具有重要意义。