邻苯二甲酸二丁酯通过BMP15/p38-MAPK/AMH通路激活原始卵泡促进中枢性性早熟的机制研究

本研究针对环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱发中枢性性早熟(CPP)的机制展开探索，通过建立小鼠模型和体外卵巢培养系统，首次揭示DBP通过下调BMP15表达抑制p38-MAPK磷酸化，进而降低抗苗勒管激素(AMH)水平，加速原始卵泡激活并促进HPOA轴活化。该发现为CPP的防治提供了新靶点，并为环境污染物生殖毒性评估提供重要依据。

　　

近年来，女孩性早熟发病率呈现显著上升趋势，其中80%属于中枢性性早熟(CPP)。这种青春期提前不仅导致身材矮小、心理障碍，还与成年后代谢性疾病和激素依赖性癌症密切相关。环境内分泌干扰物被认为是重要诱因，尤其是广泛存在于日化品中的邻苯二甲酸二丁酯(DBP)——美国环保署优先管控污染物，其儿童暴露量甚至超过欧盟设定的每日耐受摄入量。虽然流行病学已证实DBP暴露与CPP显著相关，但具体机制尚未阐明。广东妇女儿童医院的研究团队在《Ecotoxicology and Environmental Safety》发表的研究，首次从原始卵泡激活角度揭示了DBP诱发CPP的分子机制。

研究采用ICR小鼠模型和新生儿卵巢体外培养系统，通过阴道开口时间监测、卵泡分期计数、ELISA检测激素水平、RT-qPCR和Western blot等技术手段。在动物实验中设置DBP暴露组和c-Kit抑制剂马赛替尼干预组，体外实验则采用MBP(DBP活性代谢物)处理卵巢组织并添加BMP15或p38-MAPK激活剂去氢紫堇碱。

3.1 DBP暴露导致阴道开口提前
5-20日龄小鼠暴露于DBP后，中高剂量组(5/50 mg/kg)体重显著增加，阴道开口时间较对照组提前3-4天，提示DBP可剂量依赖性加速青春期启动。

3.2 Kit抑制剂延迟阴道开口
马赛替尼处理组(30 mg/kg)成功逆转了DBP诱导的青春期提前，证实c-Kit介导的原始卵泡激活是CPP发展的必要条件。

3.3 DBP促进下丘脑基因表达
DBP组下丘脑KISS1和GPR54 mRNA表达显著上调，该基因编码的kisspeptin-GPR54系统是促性腺激素释放激素(GnRH)脉冲分泌的关键调控者。

3.4 DBP改变血清激素水平
DBP暴露组血清黄体生成素(LH)和雌二醇(E₂
)浓度分别升高2.1倍和1.8倍，而马赛替尼仅抑制E₂
分泌，表明其对HPOA轴中枢活动无干扰。

3.5 DBP加速原始卵泡激活
组织学分析显示DBP组原始卵泡占比下降40%，初级卵泡和窦前卵泡分别增加65%和120%，该效应可被马赛替尼完全阻断。

3.6 DBP降低卵巢BMP15表达和血清AMH水平
Western blot检测发现DBP组卵巢骨形态发生蛋白15(BMP15)表达降低60%，ELISA显示血清AMH浓度下降45%，提示卵母细胞质量受损。

3.7 BMP15通过p38-MAPK通路调控AMH表达
体外实验证实：MBP处理使p38-MAPK磷酸化水平降低55%，SOX9转录因子和AMH表达分别下降42%和48%；添加BMP15或p38-MAPK激活剂均可恢复AMH表达，证实BMP15/p38-MAPK/SOX9是调控AMH分泌的关键通路。

这项研究首次阐明原始卵泡激活在CPP发生中的核心地位，揭示DBP通过"下丘脑KISS1/GPR54系统激活+卵巢BMP15/p38-MAPK/AMH通路抑制"的双重作用机制促进CPP。特别值得注意的是，使用临床已获批的c-Kit抑制剂马赛替尼可有效延缓青春期启动，这为CPP防治提供了潜在治疗策略。从公共卫生角度，研究证实广泛存在的DBP暴露可通过干扰原始卵泡库动态平衡影响生殖健康，为制定更严格的环境污染物管控标准提供了科学依据。未来研究可进一步探索其他卵泡激活通路(如PI3K/Akt、Hippo通路)在CPP中的作用，以及DBP暴露对女性生育力储备的长期影响。