TS-2021武装的CD70 CAR-T细胞通过外源转导增强抗胶质母细胞瘤疗效

本研究针对胶质母细胞瘤(GBM)治疗中CAR-T细胞疗法面临的肿瘤抗原异质性和免疫抑制微环境两大难题，创新性地将第三代溶瘤腺病毒(OAd)TS-2021与CD70 CAR-T细胞结合。研究人员通过体外转导技术构建了携带IL-15的CAR-TTS-2021 细胞，证实其能有效递送病毒并激活JAK-STAT/MAPK-ERK通路，显著增强抗肿瘤效果并克服T细胞耗竭。该研究为实体瘤免疫治疗提供了可转化的协同策略。

　　

胶质母细胞瘤(GBM)作为最具侵袭性的原发性脑肿瘤，传统治疗手段收效甚微，患者中位生存期不足15个月。尽管嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法在血液肿瘤中取得突破，但在GBM治疗中却遭遇三重障碍：肿瘤抗原的高度异质性导致靶点丢失、免疫抑制微环境阻碍T细胞浸润，以及持续抗原刺激引发的T细胞耗竭。更棘手的是，血脑屏障限制药物递送，而单独使用溶瘤病毒又面临靶向性不足的困境。

首都医科大学附属北京天坛医院神经外科研究所的研究团队在《Journal of Experimental 》发表创新成果，他们巧妙地将两种前沿疗法——CAR-T细胞与溶瘤病毒有机结合。通过基因工程改造的第三代溶瘤腺病毒(OAd)TS-2021（携带IL-15基因）转导CD70特异性CAR-T细胞，构建出新型CAR-T^TS-2021
细胞，既能精准递送病毒至肿瘤部位，又能通过自分泌IL-15维持T细胞活性。这种"导弹-弹头-推进系统"一体化设计，为克服GBM治疗抵抗提供了全新思路。

研究采用多组学技术验证机制：通过流式细胞术分析T细胞表型变化，qPCR检测病毒载量动态，RNA测序揭示转录组特征，Western blotting解析关键通路蛋白。建立原位GBM小鼠模型评估疗效，并通过Transwell实验证实抗原依赖性病毒递送机制。临床前样本来自健康供者外周血单个核细胞(PBMCs)和患者来源的GBM细胞系。

【Effective delivery of OAd-GFP via tumor-targeted CAR-T cells】研究发现，采用离心转导法可使OAd-GFP以400:1的感染复数(MOI)有效感染CAR-T细胞，感染率保持17.8%达7天。关键机制在于CAR-T细胞高表达Ki67启动子驱动的病毒复制元件。Transwell实验证实，CD70 CAR-T^OAd-GFP
能通过抗原特异性方式将病毒递送至肿瘤细胞，48小时内使80%的U251细胞呈现GFP阳性。

【CAR-T^OAd-GFP
cells exhibit superior anti-GBM efficacy】在模拟临床治疗的荷瘤小鼠模型中，CAR-T^OAd-GFP
联合治疗组展现显著优势：肿瘤荧光信号降低90%，生存期延长2倍以上。值得注意的是，对于CD70低表达的BT01细胞，传统CAR-T疗效有限（仅30%杀伤率），而CAR-T^OAd-GFP
将杀伤率提升至65%，证明该策略可克服抗原异质性。

【CAR-T^TS-2021
cells show improved expansion and persistence】IL-15的引入带来突破性改变：CAR-T^TS-2021
中naive/记忆干细胞比例提升至42%，耗竭标志物(PD-1/TIM-3/LAG-3)表达降低60%。机制上，IL-15通过自分泌激活JAK-STAT5和MAPK-ERK通路，使细胞增殖率提高3倍，并修复OAd引起的DNA损伤（γ-H2AX水平下降70%）。

【CAR-T^TS-2021
alleviates acquired resistance】在模拟抗原丢失(AML)的实验中，当CD70阳性率降至50%时，CAR-T^TS-2021
仍保持68%的杀伤效率，显著优于普通CAR-T的35%。高通量细胞因子检测显示，治疗组IFN-γ分泌增加5倍，而促炎因子IL-6未见升高，说明兼具疗效与安全性。

这项研究开创性地将溶瘤病毒与CAR-T细胞整合为统一治疗平台，TS-2021既作为"弹头"增强肿瘤杀伤，又通过IL-15维持CAR-T细胞"推进系统"。临床转化价值体现在三方面：①抗原依赖性病毒递送突破血脑屏障限制；②IL-15自分泌环路解决T细胞耗竭难题；③双机制协同克服抗原异质性。该策略为实体瘤免疫治疗提供了可扩展的范式，目前已在复发GBM临床试验中展示潜力。未来研究可进一步优化病毒载体安全性，探索与其他免疫调节剂的联合应用。