睾酮治疗诱导的子宫肌层转录组与DNA甲基化组改变模拟子宫肌瘤患者的分子特征

这篇研究揭示了睾酮（testosterone）治疗对子宫肌层（myometrium）的深远影响，通过RNA测序和甲基化芯片分析发现，睾酮处理的肌层组织（MyoT）在转录组和表观遗传（DNA methylation）层面与子宫肌瘤患者肌层（MyoF）高度相似，而与正常肌层（MyoN）显著不同。研究鉴定出1321个差异表达基因（DEGs），包括TGFβ3、CCND1等肌瘤相关基因上调，且疾病本体分析显示肌瘤基因集显著富集。尽管甲基化谱与基因表达无直接关联，但结果提示外源性睾酮可能通过诱导肌层分子重塑增加肌瘤风险，为激素依赖性肌瘤发病机制提供了新视角。

　　

Abstract
子宫肌瘤（uterine fibroids）是女性最常见的良性肿瘤，80%的女性在50岁前患病，但目前除子宫切除术外缺乏有效疗法。研究发现多囊卵巢综合征（PCOS）等高雄激素状态与肌瘤风险相关，但睾酮对肌层的作用机制尚不明确。本研究通过对比无肌瘤（MyoN）、肌瘤患者（MyoF）及睾酮治疗（MyoT）的肌层样本，首次证实MyoT与MyoF在转录组和甲基化谱上高度相似，提示睾酮可能驱动肌层向促肌瘤表型转化。

Introduction
肌瘤发病机制涉及遗传、激素（如雌激素/孕酮）及环境因素，但睾酮的作用长期被忽视。流行病学显示PCOS患者肌瘤风险增加1.65倍，而这类患者普遍存在高雄激素血症。前期研究发现肌瘤患者的肌层（MyoF）本身即存在分子异常，且非裔美国人肌层更易呈现"前肌瘤状态"。本研究假设睾酮通过改变肌层生物学特性促进肌瘤发生。

Materials and Methods
收集33例MyoN、66例MyoF（含MED12突变）及7例性别焦虑症患者的睾酮治疗肌层（MyoT）。采用RNA-seq和Infinium MethylationEPIC芯片分析，差异基因通过edgeR鉴定（FDR<0.05），甲基化差异位点（DMLs）用SeSAMe分析。通过qPCR验证关键基因表达，包括TGFβ3、FGFR1等。

Results
UMAP分析显示MyoT与MyoF聚为一类，与MyoN明显分离。MyoT vs MyoN鉴定出1321个DEGs，其中90%与MyoF vs MyoN重叠，包括TGFβ3（上调2.1倍）、SERPINE1（上调1.8倍）等促纤维化基因。疾病网络分析显示"肌瘤肿瘤"基因集在两组中均最显著富集。甲基化谱显示MyoT存在6886个DMLs，55%位于基因体区，其中55个低甲基化和174个高甲基化位点与MyoF共享。有趣的是，雄激素响应基因FKBP5在MyoT和MyoF中均显著上调（p<0.01），但甲基化变化与基因表达无直接相关性。

Discussion
该研究首次建立睾酮暴露与肌瘤分子特征的直接联系：① 重现肌瘤相关基因（如TGFβ3、FGFR1）表达模式；② 诱导类似MyoF的表观遗传重塑；③ 激活NF-κB和肌生成等促纤维化通路。尽管样本量限制（n=7）和缺乏激素水平数据是局限，但结果与PCOS-肌瘤流行病学证据高度吻合。特别值得注意的是，甲基化改变主要发生在CpG岛和开放海域区域，提示睾酮可能通过长期表观遗传编程影响肌层易感性。未来需探索睾酮是否通过直接激活雄激素受体（AR）或间接改变雌激素/孕酮平衡发挥作用，这为开发抗雄激素疗法预防高风险人群（如PCOS患者）肌瘤发生提供了理论依据。