嵌合血凝素与M2 mRNA疫苗Fluaxe：实现广谱流感亚型保护的新突破

为解决季节性流感疫苗保护范围有限和预测不准确的问题，研究人员开发了基于mRNA-LNP平台的嵌合HA(cH5/1-BV, cH7/3)和完整M2蛋白的广谱流感疫苗Fluaxe。该疫苗在小鼠模型中诱导了交叉中和抗体、T细胞应答和长效免疫，显著降低多种致死性流感病毒感染的肺部损伤和炎症反应，为通用流感疫苗(UIV)开发提供了新策略。

　　

流感病毒每年导致全球数百万人重症和数十万死亡，传统疫苗因病毒抗原漂移(antigenic drift)和抗原转换(antigenic shift)而效果受限。尽管世界卫生组织(WHO)强调开发通用流感疫苗(UIV)的紧迫性，但现有技术平台难以平衡广谱保护与免疫原性。中国医学科学院医学生物技术研究所等机构的研究团队在《npj Vaccines》发表研究，通过创新性结合mRNA-LNP递送系统和嵌合免疫原策略，开发出可对抗6种主要流感亚型（包括高致病性禽流感H5N1/H7N9）的疫苗Fluaxe。

研究采用AlphaFold2预测嵌合血凝素(cHA)结构，通过体外转录(IVT)合成编码cH5/1-BV（H5N1头域+H1N1茎部+IBV Victoria连接）、cH7/3（H7N9头域+H3N2茎部）和完整M2的mRNA，并封装入脂质纳米颗粒(LNP)。通过ELISA、微中和试验(MN)、血凝抑制(HAI)和假病毒中和试验评估体液免疫；利用流式细胞术(FACS)和酶联免疫斑点(ELISpot)分析T细胞应答；采用致死剂量病毒(10LD₅₀
)攻毒模型验证保护效果。

免疫原设计与疫苗质量评估
通过结构模拟证实嵌合HA保留了天然构象和关键二硫键（如H5的Cys⁵⁸
-Cys²⁹⁰
）。Western blot显示疫苗抗原在HEK293T细胞中高效表达，免疫荧光证实其正确膜定位。

Fluaxe诱导广谱交叉反应抗体
双剂量肌注免疫后，血清对H1N1/H3N2/H5N1/H7N9及IBV谱系IgG滴度显著升高（GMT提升9.6倍），且Th1型抗体（IgG2a/IgG1比值）占优势。假病毒中和试验显示对IAV群1（H2/H6/H8等）和群2（H15）的交叉保护。

强效T细胞免疫应答
肺组织中CD3⁺
T细胞比例增加，CD8⁺
/CD4⁺
比值达2.6（脾脏为1.1），IFN-γ⁺
和IL-2⁺
T细胞频率提升19倍。H7N9和IBV抗原更倾向激活CD8⁺
T细胞，而H3N2和M2偏好CD4⁺
应答。

长效免疫记忆形成
免疫后104天仍可检测到CD44⁺
CD62L⁺
中枢记忆T细胞(T_cm
)和CD103⁺
组织驻留记忆T细胞(T_rm
)。CXCR3^hi
循环记忆T细胞提示肺部归巢潜能。六种HA特异性记忆B细胞(MBC)证实多亚型保护基础。

全面保护与炎症调控
疫苗使H1N1攻毒后肺病毒载量降低180倍，完全阻止IBV致死感染。病理分析显示肺泡间隔增厚和炎症浸润显著减轻，紧密连接蛋白(E-cadherin/ZO-1)表达恢复。BALF中IL-10等抗炎因子上调，NLRP3炎症小体激活被抑制。

该研究首次验证了嵌合HA与完整M2的mRNA疫苗组合策略，其优势在于：①通过异源头-茎设计突破HA头部免疫显性限制；②M2增强对IAV的交叉保护；③mRNA-LNP平台实现天然蛋白折叠与高效递送；④诱导肺部特异性CD8⁺
T_rm
细胞。相比传统四价灭活疫苗(QIIV)，Fluaxe对H3N2和IBV的中和抗体提升2.3倍，且能应对潜在禽流感跨种传播威胁。研究为应对流感大流行提供了创新技术路径，但未来需在非人灵长类中验证效果并优化免疫程序。