WT1特异性TCR基因治疗急性髓系白血病复发患者的I/II期临床试验：NK样表型偏移导致T细胞功能与持久性受损

本研究针对异基因造血细胞移植(HCT)后复发/难治性急性髓系白血病(AML)患者，开展WT1特异性TCR基因修饰T细胞(TTCR-C4 )的I/II期临床试验。结果显示EBV特异性TTCR-C4 比CMV特异性产品持久性更佳，但AML微环境诱导T细胞向NK样(NKL)终末分化表型偏移，导致功能衰退。单细胞测序揭示AML特有的T细胞功能障碍机制，为优化细胞疗法提供新靶点。

　　

急性髓系白血病(AML)患者在异基因造血细胞移植(HCT)后复发仍是临床难题，传统挽救疗法2年生存率不足20%。虽然T细胞受体(TCR)基因工程T细胞疗法在血液肿瘤中展现出潜力，但AML独特的免疫微环境导致治疗效果有限。此前研究观察到WT1特异性TCR-T细胞(T_TCR-C4
)在预防性应用中可100%防止高危患者复发，但其在活动性疾病中的表现及机制尚不明确。

Fred Hutchinson癌症中心的研究团队在《Nature Communications》发表了突破性研究，通过I/II期临床试验(NCT01640301)评估了15例HCT后复发AML患者接受EBV/CMV特异性T_TCR-C4
治疗的效果。研究采用多组学方法，包括24色光谱流式细胞术、单细胞RNA测序(scRNAseq)和体外慢性抗原刺激模型，结合临床队列分析。

病毒特异性底物决定T_TCR-C4
持久性
• 光谱流式显示EBV特异性T_TCR-C4
持久性显著优于CMV特异性产品(>3% CD8⁺
阈值维持100天)
• 质谱流式(CyTOF)分析143例健康人数据证实EBV特异性CD8⁺
T细胞更多保持中央记忆表型(T_CM
)，而CMV特异性细胞偏向终末效应记忆(T_EMRA
)

AML驱动NKL终末分化
• 单细胞转录组鉴定出13个CD8⁺
T细胞亚群，T_TCR-C4
主要富集于中间分化状态
• RNA速度分析揭示T_TCR-C4
从效应记忆向NKL/T_EMRA
的分化轨迹，伴随细胞毒性基因(KLRG1, PRF1)上调
• AML阳性样本中NKL特征基因(ZEB2, S1PR5)表达显著增加，与经典耗竭程序(PD1, TIM3)形成对比

阿扎胞苷调控T细胞命运
• 个案分析显示阿扎胞苷治疗期间T_TCR-C4
克隆扩增并维持21个月疾病控制
• 体外实验证实10nM阿扎胞苷可减少CD57⁺
KLRG1⁺
NKL细胞比例达50%(p<0.05)
• 纵向单细胞测序发现治疗响应期T_TCR-C4
自我更新基因(TCF7, LEF1)表达增强

这项研究首次系统阐明了AML微环境诱导T细胞功能障碍的独特机制——不同于实体瘤的经典耗竭路径，AML特异性驱动NKL样终末分化。该发现解释了检查点抑制剂在AML疗效有限的原因，并为联合表观遗传调控(如阿扎胞苷)的优化方案提供了理论依据。Francesco Mazziotta等通过创新性地追踪基因修饰T细胞的体内命运，为克服AML免疫治疗瓶颈开辟了新思路，其建立的分析框架对其它血液肿瘤的细胞疗法研发也具有重要参考价值。