肝细胞癌获得性乐伐替尼耐药中AHR-AREG驱动的EGFR-ERK1/2-CyclinD1信号轴分子机制解析

本研究聚焦肝细胞癌(HCC)一线靶向药物乐伐替尼(Len)的获得性耐药难题，通过建立耐药细胞株(HuH7LR/Hep3BLR)和异种移植模型，揭示乐伐替尼通过激活芳烃受体(AHR)核转位诱导双调蛋白(AREG)自分泌，进而激活EGFR-ERK1/2-CyclinD1信号轴的关键机制。研究发现ERK1/2抑制剂ravoxertinib(RAV)和AHR抑制剂CH-223191(CH)可显著逆转耐药性，为临床克服HCC靶向治疗耐药提供新策略。

　　

肝细胞癌(HCC)作为全球第六大高发癌症，其治疗困境犹如一场医学界的"攻坚战"。尽管乐伐替尼(Lenvatinib)这类多靶点酪氨酸激酶抑制剂(TKI)已成为晚期HCC的一线治疗选择，但高达70%的患者会在用药6个月内出现获得性耐药——这个数字背后，是无数患者被迫中断治疗的残酷现实。更棘手的是，既往研究多局限于耐药细胞株的简单比对，对表皮生长因子受体(EGFR)异常激活这一关键耐药机制的认识仍如"雾里看花"。中国的研究团队决心揭开这个谜团，他们的研究成果最终发表在《Biochemical Pharmacology》上。

研究团队采用四步法破解耐药密码：首先通过长期药物暴露建立稳定耐药细胞株(HuH7LR/Hep3BLR)；接着运用转录组测序锁定关键分子AREG；再通过染色质免疫共沉淀(ChIP)验证AHR对AREG的转录调控；最后构建异种移植模型验证靶向干预效果。

【Reversal of p-ERK1/2 expression drives lenvatinib resistance in HCC】
耐药细胞中出现了戏剧性转变：原本被乐伐替尼抑制的p-ERK1/2和CyclinD1竟"反客为主"呈现持续激活状态。当研究人员用ERK1/2抑制剂ravoxertinib(RAV)阻断该通路时，耐药细胞的药物敏感性恢复如初，IC₅₀
值下降达5.8倍。

【Molecular dissection reveals AHR-AREG-EGFR axis】
转录组分析显示AREG mRNA在耐药细胞中飙升12.7倍。机制上，乐伐替尼像一把"分子钥匙"促使AHR核转位，直接结合AREG启动子区-985bp/-736bp位点。外源添加AREG蛋白可使敏感细胞迅速获得耐药性，而敲低AREG则使耐药细胞重新"臣服"于乐伐替尼。

【In vivo validation of therapeutic targets】
动物实验呈现令人振奋的结果：RAV与乐伐替尼联用使肿瘤体积缩小68.2%，而AHR抑制剂CH-223191(CH)治疗组肿瘤生长抑制率达59.4%。免疫组化显示联合治疗组Ki-67阳性细胞减少83%，凋亡细胞增加5.1倍。

这项研究首次绘制出"AHR核转位→AREG自分泌→EGFR-ERK1/2-CyclinD1信号轴激活"的完整耐药路线图。特别值得注意的是，AHR这个传统认为的环境毒素受体，在此研究中被揭示出调控肿瘤耐药的全新功能。临床转化方面，RAV作为已进入II期临床的ERK1/2抑制剂，与CH-223191共同构成"双靶点"逆转策略，为破解HCC靶向治疗耐药困局提供切实可行的解决方案。正如研究者所言："我们不仅找到了耐药机制的'开关'，更发现了可以立即投入临床验证的'钥匙'"。