三七通过TLR4/MyD88/NF-κB通路调控小胶质细胞极化保护血视网膜屏障的机制研究

针对葡萄膜炎（uveitis）中血视网膜屏障（BRB）破坏及小胶质细胞异常激活的临床难题，北京中医药大学团队聚焦传统中药三七（Panax notoginseng）的干预机制。研究发现三七通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路，调控M1/M2型小胶质细胞极化，显著减轻内毒素诱导的葡萄膜炎（EIU）模型炎症反应，其活性成分人参皂苷Rd、Rg1及三七皂苷R1展现出协同保护作用，为开发靶向免疫调节的中药疗法提供新依据。

　　

葡萄膜炎作为全球致盲第三大病因，约35%患者面临严重视力丧失风险。当前临床依赖糖皮质激素和免疫抑制剂，但长期使用易引发眼压升高、骨髓抑制等副作用。更棘手的是，血视网膜屏障（Blood-Retinal Barrier, BRB）的破坏和小胶质细胞过度激活是推动疾病进展的关键环节。这些免疫细胞在炎症刺激下极化为促炎的M1表型，释放肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）等因子，加剧BRB损伤。尽管传统中药三七复方在临床显示疗效，其单药作用机制却长期未明。

北京中医药大学团队在《International Immunopharmacology》发表的研究，首次揭示了三七通过Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核因子κB（NF-κB）通路调控小胶质细胞极化的分子机制。研究人员采用内毒素诱导葡萄膜炎（Endotoxin-Induced Uveitis, EIU）小鼠模型，通过裂隙灯观察、HE染色评估炎症程度，结合Western blot和转录组测序技术，发现三七干预显著降低视网膜中TLR4、MyD88表达及NF-κB磷酸化水平，同时促进M2型标志物CD206和白细胞介素-10（IL-10）的表达。

关键技术方法
研究通过玻璃体内注射脂多糖（LPS）建立EIU模型，预给药7天评估药效；采用超高效液相色谱-静电场轨道阱质谱（UHPLC-Q Exactive-Orbitrap MS）分析三七化学成分；通过免疫荧光和Western blot检测BRB相关蛋白及小胶质细胞极化标志物；利用BV2小胶质细胞系验证活性成分作用。

研究结果

1. 三七缓解EIU眼部炎症
裂隙灯摄影显示三七组前房炎症细胞浸润减少，HE染色证实视网膜结构损伤减轻。Evans蓝渗出实验表明三七有效维持BRB完整性，降低血管通透性。

2. 调控小胶质细胞M1/M2平衡
免疫荧光显示三七组M1型标记物iNOS⁺
细胞减少，M2型标记物Arg-1⁺
细胞增加。流式细胞术进一步证实三七促进M2型极化比例从21.3%提升至47.6%。

3. 抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路
Western blot显示三七及其活性成分（人参皂苷Rd、Rg1和三七皂苷R1）均能下调视网膜组织中TLR4、MyD88蛋白表达，抑制IκBα磷酸化，阻断NF-κB核转位。

结论与意义
该研究不仅阐明三七通过"TLR4-MyD88-NF-κB轴"调控小胶质细胞极化保护BRB的机制，更首次明确其活性成分组合（Rd+Rg1+R1）具有与全药相当的抗炎效果。这一发现为开发靶向免疫微环境的中药新药提供理论支撑，同时为减少激素依赖治疗策略开辟新路径。研究团队特别指出，三七的多成分协同作用模式可能成为复杂炎症疾病干预的范式，未来需进一步探索各成分的时空药效动力学。