综述：毛细管电泳技术在酶抑制剂筛选中的研究进展

（编辑推荐）本综述系统梳理了2019-2024年间毛细管电泳（CE）在酶抑制剂筛选中的应用进展，重点对比了均相（homogeneous）与非均相（heterogeneous）系统模式的技术优势。CE凭借温和缓冲体系、多样分离模式、低样本消耗等特点，成为克服高效液相色谱（HPLC）、光谱法等传统技术局限性的关键工具，为靶向酶（如α-葡萄糖苷酶、脂酶）的代谢疾病药物研发提供新思路。

　　

Abstract
酶作为具有高度特异性催化活性的蛋白质，与代谢、信号转导等生理过程密切相关，是药物研究的重要靶点。酶抑制剂作为先导分子的重要来源，其快速、准确、可靠的筛选方法开发极具价值。毛细管电泳（CE）凭借温和缓冲体系、多样分离模式、短分析时间和低样本消耗等独特优势，已成为酶抑制剂筛选的有力工具。本文系统总结了2019-2024年基于均相与非均相系统模式的CE技术研究进展，并探讨了该领域的技术挑战与发展趋势。

Introduction
酶作为高效生物催化剂，其异常调控与多种疾病相关。例如，脂酶抑制剂通过抑制膳食甘油三酯吸收防治肥胖，α-葡萄糖苷酶抑制剂可延缓碳水化合物消化以治疗II型糖尿病。传统筛选方法如高效液相色谱（HPLC）存在有机溶剂消耗大、色谱柱成本高的问题；光谱法则受限于分析物光谱特性差异。CE通过紫外（UV）或质谱（MS）联用技术，能有效分离结构或分子量相近的生物分子，且无需固定相，避免了抑制剂与固定相的非特异性结合问题。

Offline homogeneous analysis
均相离线分析中，酶与底物在溶液中直接反应，经淬灭后转移至毛细管电泳分析。该方法无需载体修饰，避免了酶构象变化或活性位点掩蔽，适用于快速筛选可逆抑制剂（如竞争性抑制剂IC₅₀
测定）。典型案例包括通过CE-UV联用检测β-内酰胺酶抑制剂对底物水解产物的定量分析。

Offline heterogeneous analysis
非均相离线分析将酶固定于载体（如磁性纳米颗粒或整体柱IMER），反应后分离检测。载体材料创新是近年研究热点，例如基于金属有机框架（MOF）的固定化酶载体可提高酶稳定性。此模式尤其适用于多酶级联反应研究，如糖代谢通路中多个酶抑制剂的同步筛选。

CE for enzyme inhibition kinetics research
CE可精准测定抑制动力学参数（如K_i
值），区分竞争性、非竞争性和反竞争性抑制机制。在线反应监测技术（如动态pH梯度CE）能实时追踪酶促反应进程，为不可逆抑制剂（如共价结合型）的作用机制研究提供新视角。

Conclusion
CE技术通过多元化操作模式推动酶抑制剂筛选发展，其中非均相系统因载体创新备受关注。未来趋势包括微流控CE整合、人工智能辅助数据分析等，这些突破将进一步加速靶向酶药物的研发进程。